乙酰葛根素對(duì)低糖低氧損傷大鼠皮層神經(jīng)元的保護(hù)作用.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文乙酰葛根素對(duì)低糖低氧損傷大鼠皮層神經(jīng)元的保護(hù)作用姓名：蔡雅衛(wèi)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：張岫美20050516山東大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要乙酰葛根素對(duì)低糖低氧損傷大鼠皮層神經(jīng)元的保護(hù)作用碩士研究生指導(dǎo)教師蔡雅衛(wèi)張岫美教授目的缺血性腦血管疾病是嚴(yán)重危害人類健康的一類疾病，是人類死亡的主要原因之一。溶栓治療在為患者帶來(lái)康復(fù)希望的同時(shí)，也帶來(lái)了不容忽視的問(wèn)題一腦缺血再灌注損傷因此在缺血性腦血管疾病的治療方面在開(kāi)

2、展溶栓治療的同時(shí)積極尋找有效的腦保護(hù)藥物具有重要的意義。乙酰葛根素是在葛根素的基礎(chǔ)上引入側(cè)鏈得到的新型異黃酮類化合物。實(shí)驗(yàn)證明，乙酰葛根素能縮小大腦中動(dòng)脈栓塞大鼠的腦梗死面積，提高損傷大鼠的神經(jīng)生物學(xué)評(píng)分，改善腦組織的缺血損傷，對(duì)缺血性腦血管疾病可能有一定的治療作用。本試驗(yàn)的目的是從細(xì)胞及分子水平上，通過(guò)體外培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元建立“缺血再灌注”損傷模型，觀察乙酰葛根素對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)作用并進(jìn)一步探討其保護(hù)作用機(jī)制。方法無(wú)菌條件下進(jìn)行大鼠皮

3、層神經(jīng)元原代培養(yǎng)，加入阿糖胞苷抑制非神經(jīng)元細(xì)胞的生長(zhǎng)進(jìn)行純化，免疫細(xì)胞化學(xué)ABC法進(jìn)行神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)鑒定，證實(shí)培養(yǎng)的細(xì)胞為神經(jīng)元并確定其純度。取培養(yǎng)12d的細(xì)胞，隨機(jī)分組為：①正常組；②低糖低氧損傷組；③乙酰葛根素高、中、低濃度組(1610一mol／L、4X10一mol／L、lX101mol／L)；④葛根素組(4X10～mol／L)。正常對(duì)照組常規(guī)換液一次，除去其余各組細(xì)胞的原培養(yǎng)液，用無(wú)糖Earle’s液洗2遍后，加入

4、含5X10’4mol／L連二亞硫酸鈉的無(wú)糖Earle’s液，置培養(yǎng)箱中37℃、5％C02、飽和濕度下培養(yǎng)2h后，換成DMEM完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，模擬體內(nèi)缺血再灌注過(guò)程。各給藥組在損傷處理過(guò)程中分別加入含不同濃度乙酰葛根素或葛根素的無(wú)糖Earle’s液及DMEM完全培養(yǎng)基。再灌注損傷24h后MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞的存活率，倒置相差顯微鏡下進(jìn)行一般形態(tài)學(xué)觀察，比色法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH活性、H202含量，并檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)SOD、GSHpx活性及