基于溫散法的肝積散抗肝纖維化的機(jī)理研究.pdf

1、目的：研究中醫(yī)古典理論“五積”中“肝積”、“脾積”與肝纖維化的相關(guān)性，提出“溫散”的中醫(yī)康復(fù)法則，在古方基礎(chǔ)上創(chuàng)制方藥“肝積散”。通過實(shí)驗(yàn)研究，觀察肝積散對(duì)肝纖維化大鼠肝細(xì)胞酶、血清肝纖維化標(biāo)志物、抗脂質(zhì)過氧化、肝星狀細(xì)胞及細(xì)胞因子的影響，探討基于溫散法的肝積散抗肝纖維化的作用機(jī)理。
　　 方法：用Wister雄性大鼠102只，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為2組，分別為正常對(duì)照組12只、造模組90只。
　　 造模組腹腔注射40

2、％的四氯化碳石蠟油造模劑，首次0.5ml/100g體重，之后每次為0.3ml/100g體重，每周2次，正常對(duì)照組注射等量0.9%氯化鈉注射液。進(jìn)行4周造模之后改為每周1次，再進(jìn)行8周，共進(jìn)行12周。造模并以10%的酒精作為以上造模組的唯一飲料，正常對(duì)照組給以生理鹽水。造模4周之后隨機(jī)抽取造模組中10只處死，證實(shí)肝纖維化模型已經(jīng)建立成功之后的60只大鼠分為正常對(duì)照組、模型組、秋水仙堿片組、肝積散低劑量組、肝積散中劑量組、肝積散高劑量組，并

3、開始進(jìn)行灌胃給藥治療。具體方法：模型組和正常對(duì)照組給予蒸餾水1.5ml/100g體重，秋水仙堿片組按每只0.01mg/100g，肝積散低劑量治療組給予中藥復(fù)方0.05g/200g，中劑量治療組給予中藥復(fù)方0.1g/200g，高劑量治療組給予中藥復(fù)方0.2g/200g，共治療8周。
　　 治療8周后，眼球后取血后處死大鼠。統(tǒng)一留取大鼠肝右葉標(biāo)本置于10%甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋切片，HE染色。
　　 結(jié)果：根據(jù)病理組織切

4、片所示，本研究所有造模大鼠肝臟均可見不同程度的肝細(xì)胞水樣變性和脂肪變性、纖維結(jié)締組織增生、炎細(xì)胞浸潤，表明本研究造模成功。模型組大鼠肝組織炎癥和纖維化程度較正常組明顯增高(P＜0.01)；血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、丙二醛(MDA)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、肝組織結(jié)締組織生長因子(CTGF)、金屬蛋白酶組織抑制因子-1（TIMP-1）

5、、CTGFmRNA、TIMP-1mRNA、肝星狀細(xì)胞大麻素受體CB1和CB2、活化的肝星狀細(xì)胞的表達(dá)均較正常組明顯增高(P＜0.05，P＜0.01)；血清中超氧化物歧化酶(SOD)較正常組明顯降低(P＜0.01)。
　　 用肝積散高、中、低劑量治療后，大鼠肝組織炎癥和纖維化程度較模型組明顯減輕(P＜0.05.P＜0.01)；血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、Ⅲ型前

6、膠原(PCⅢ)、丙二醛(MDA)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、肝組織結(jié)締組織生長因子(CTGF)、金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)、CTGFmRNA、TIMP-1mRNA、肝星狀細(xì)胞大麻素受體CB1、活化的肝星狀細(xì)胞的表達(dá)均較模型組明顯降低(P＜0.05，P＜0.01)；血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和肝星狀細(xì)胞大麻素受體CB2較模型組明顯升高(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：基于溫散法的肝積散能夠下調(diào)肝纖維