趨化因子RANTES和受體CCR5在以及移植急性和慢性排斥反應(yīng)中的表達及意義.pdf

1、目的
　　 觀察調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達和分泌細(xì)胞因子(regulateduponactivationnormalTexpressedandsecreted，RANTES)及其受體CCR5在大鼠同種心臟移植急性及慢性排斥反應(yīng)中的表達情況，探討RANTES及CCR5與移植排斥反應(yīng)之間的關(guān)系。為心臟移植術(shù)后的針對趨化因子及其受體的抗排斥反應(yīng)的靶向治療提供依據(jù)。
　　 材料與方法
　　 一.實驗動物分組及模型制作

2、　　 健康近交系Wistar大鼠為供體，Sprague-Dawley大鼠為受體。采用“套管連接血管技術(shù)”建立大鼠頸部心臟移植模型，將實驗動物分為3組，A組15只SD大鼠，B組20只SD大鼠，C組25只SD大鼠。A組:急性排斥反應(yīng)組，為Wistar至SD大鼠的移植，供、受體術(shù)前不作預(yù)處理，直接行心臟移植手術(shù);B組:環(huán)孢霉素A(CyclosporineA，CsA)組，Wistar至SD大鼠的移植，供、受體術(shù)前未做任何預(yù)處理，心臟移植術(shù)后當(dāng)

3、日開始腹腔內(nèi)注入CsA10mg/kg，每2天1次，共8～10次;C組:供者脾細(xì)胞和環(huán)磷酰胺聯(lián)合預(yù)處理組，采用Wistar大鼠的脾細(xì)胞5～10×10(∧)7個預(yù)處理SD大鼠，第2天自SD大鼠的尾靜脈內(nèi)注入環(huán)磷酰胺50～80mg/kg，第14天行頸部心臟移植術(shù)。
　　 二、病理形態(tài)學(xué)及相關(guān)因子的免疫組化測定
　　 除每組各留5只用于生存時間觀察外，分別于術(shù)后第4、7、24、56天每組各取移植心臟5例，制備成組織切片，分別用H

4、-E染色觀察移植心臟組織排斥反應(yīng)病理改變程度，VanGieson染色觀察移植心臟血管病變(CAV)的血管狹窄程度，免疫組化方法檢測RANTES和CCR5在各組移植心臟組織中的表達水平。
　　 結(jié)果
　　 一、急性排斥組移植心臟存活時間為(7.3±2.3)d;CsA組移植心臟的平均存活時間為(32.6±5.4)d;供者脾細(xì)胞和環(huán)磷酰胺聯(lián)合預(yù)處理組移植心臟平均存活時間為（209.7±42.8）d。各組間移植心存活時間差異有統(tǒng)

5、計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 二、RANTES主要表達于移植心臟血管壁內(nèi)膜及中膜，內(nèi)皮細(xì)胞及中層平滑肌細(xì)胞周圍，心肌細(xì)胞及間質(zhì)組織中，單個核侵潤細(xì)胞周圍;CCR5主要表達于移植心臟血管及移植心臟組織間質(zhì)中的單個核浸潤細(xì)胞表面。
　　 三、術(shù)后各時間點移植心臟組織中均可檢測到RANTES和CCR5的表達。術(shù)后第4、7天，A組表達較強，B、C組的表達明顯弱于A組（P＜0.05）;術(shù)后第24天，A組移植心臟已喪失，B組的表

6、達明顯強于C組，并且B組的表達強于A組在第4、7天的表達(P＜0.05);術(shù)后第56天，A、B組移植心臟已喪失，C組于第56天的表達強于其于第24天的表達(P＜0.05)。
　　 結(jié)論
　　 一、移植心臟組織中RANTES及CCR5的表達水平與急性及慢性移植排斥反應(yīng)的程度密切相關(guān)，并且在慢性排斥反應(yīng)中的表達較急性排斥反應(yīng)中更強烈。
　　 二、通過監(jiān)測RANTES和CCR5的表達水平可預(yù)測移植心臟的免疫排斥反應(yīng)狀態(tài)