抗心肌肌球蛋白抗體與慢性病毒性心肌炎小鼠心肌重構的關系及卡托普利、氧化苦參堿的干預研究.pdf

1、目的：
　　 通過建立慢性病毒性心肌炎(CVMC)小鼠的實驗動物模型，觀察實驗小鼠心臟結構、心功能的變化及血清中抗心肌肌球蛋白抗體(AMA)的表達水平及其間相關性，探討抗心肌肌球蛋白抗體與CVMC小鼠心肌重構的關系；比較卡托普利和氧化苦參堿對CVMC小鼠上述指標的干預效果，以期為CVMC的心肌保護尋求更多更好的選擇。
　　 方法：
　　 將111只4周齡BALB/c健康雄性小鼠隨機分為6組：正常對照1組(1組)(

2、n=8)，正常對照2組（2組）(n=8)，慢性病毒性心肌炎1組（3組）(n=20)，慢性病毒性心肌炎2組（4組）(n=25)，卡托普利干預組（5組）(n=25)及氧化苦參堿干預組（6組）(n=25)。以柯薩奇病毒B3株(CVB3)重復增量腹腔注射3、4、5、6組小鼠(第0、14、28天，劑量分別為0.20、0.25、0.30mL)建立慢性病毒性心肌炎模型，正常對照組小鼠同期腹腔注射等體積生理鹽水。42天將1組、3組小鼠稱重后，每只腹腔注

3、射3％水合氯醛(0.01～0.015ml/g)，麻醉后通過心臟超聲測定實驗小鼠心臟結構參數(shù)，包括心率(HR)、左室舒張末期內(nèi)徑(LVDD)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVSD)、主動脈血流峰值速度(Vp)，并計算射血分數(shù)(EF)及左室縮短分數(shù)(FS)，然后斷髓處死2組小鼠，行心肌苦味酸天狼猩紅染色評估慢性病毒性心肌炎模型制備情況。42天后，第5組小鼠給予卡托普利10Omg/kg·d，第6組小鼠給予氧化苦參堿100mg/kg·d，均灌胃給藥，每天

4、1次，共28天；第2組和第4組小鼠同期給予等體積生理鹽水灌胃。70天將所有小鼠麻醉后行心臟超聲檢查，指標同前。檢查后摘眼球取血，斷髓處死小鼠，稱取小鼠心臟質(zhì)量，計算心臟體質(zhì)量比值(HW/BW)；分別以蘇木素.伊紅(HE)、苦味酸天狼猩紅行心肌組織及心肌膠原組織特異性染色，運用圖像分析軟件計算心肌組織中膠原容積積分(CVF，％)；酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測實驗小鼠血清中AMA的表達，以光密度值（OD值）>X+2s為陽性組，

5、性組，比較兩組實驗小鼠心臟結構參數(shù)的變化。
　　 結果：
　　 1.兩CVMC組小鼠的HW/BW、LVDD及LVSD較同期正常對照組增大，HR明顯增快，而Vp、FS及EF較正常組明顯降低。卡托普利干預組及氧化苦參堿干預組小鼠各項指標均比CVMC2組明顯改善，而但兩干預組小鼠各項指標相比無顯著差異。
　　 2.CVMC組小鼠心肌HE染色顯示心肌纖維排列疏松，間質(zhì)成纖維細胞明顯增生?？ㄍ衅绽深A組及氧化苦參堿干預組小

6、鼠心肌組織病理變化均比CVMC2組明顯改善。
　　 3.兩正常對照組小鼠苦味酸天狼猩紅染色心肌細胞間隙僅可見少量紅色纖細的膠原；同期CVMC小鼠心肌膠原明顯增生、變粗，并且將心肌細胞分割呈網(wǎng)篩狀。且其CVF較同期正常對照組小鼠明顯升高。而卡托普利于預組、氧化苦參堿干預組小鼠心肌CVF均較CVMC2組顯著降低，但二者之間卻無明顯差異。
　　 4.CVMC小鼠血清AMAOD值較正常對照2組明顯升高（P<0.01），卡托普利及

7、氧化苦參堿干預后，實驗小鼠血清AMAOD值較CVMC明顯降低(P<0.05)，但兩干預組比較無統(tǒng)計學意義。
　　 5.血清AMA陽性組實驗小鼠與AMA陰性組實驗小鼠相比較，HW/BW、CVF明顯增高（P均<0.01），LVDD、LVSD明顯增大（P均<0.01），HR明顯增快(P<0.01)，Vp、FS及EF則明顯減?。≒均<0.01）。
　　 6.血清AMA與HW/BW、CVF呈正相關(rnw/Bw=0.881，P

8、.01；rCVF=0.953，P<0.01)，與Vp、FS及EF呈負相關(rvp=0.818，P<0.01；rEF=0.743，P0.05;rLVSD=0.589,P>0.05;rHR=0.295,P>0.05).
　　 結論：
　　 1.根據(jù)心臟超聲、HW/BW、心肌組織病理變化及膠原測定結果，實驗第42天

9、時，小鼠已具備慢性病毒性心肌炎的臨床及病理特征，說明此時慢性病毒性心肌炎小鼠實驗模型制備成功，證實慢性病毒性心肌炎小鼠存在心肌重構。
　　 2.慢性病毒性心肌炎小鼠血清AMA表達增高，與抗體陰性組相比，抗體陽性組HW/BW、CVF、LVDD、LVSD增加，Vp,EF、FS減少；隨著AMA表達的增高，HW/BW增加，CVF增高，Vp、EF、FS明顯減少，提示血清中AMA與慢性病毒性心肌炎小鼠心肌重構有一定的關系。
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