斑馬魚(yú)甘露糖受體的分子克隆和功能研究.pdf

1、甘露糖受體(mannose receptor,MR)是一種模式識(shí)別受體(pattern-recognitionreceptors，PRRs)，在病原微生物引起的機(jī)體免疫應(yīng)答中至關(guān)重要。關(guān)于哺乳動(dòng)物和鳥(niǎo)類(lèi)的甘露糖受體研究很多，但是魚(yú)類(lèi)甘露糖受體的研究甚少。本論文分離并鑒定了溫和氣單胞菌是斑馬魚(yú)的致病菌，在此基礎(chǔ)上，研究了斑馬魚(yú)甘露糖受體和溫和氣單胞菌感染的關(guān)系，主要結(jié)果如下:
　　1.克隆得到了斑馬魚(yú)的甘露糖受體基因全長(zhǎng)，命名為zf

2、MR，基因的cDNA全長(zhǎng)為6248 bp，其中5'UTR為119bp，3'UTR為1842 bp，ORF為4287 bp，編碼1428 aa。預(yù)測(cè)的氨基酸序列表明，zfMR包含一個(gè)富含半胱氨酸區(qū)域，一個(gè)Ⅱ型纖連蛋白區(qū)域，八個(gè)串聯(lián)的C型凝集素樣區(qū)域，一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和一個(gè)胞質(zhì)尾區(qū)。構(gòu)建的進(jìn)化樹(shù)表明，斑馬魚(yú)zfMR與草魚(yú)和團(tuán)頭魴的MR聚為一支組成硬骨魚(yú)類(lèi)分支。
　　2.甘露糖受體的mRNA在健康斑馬魚(yú)的肝臟、脾臟、腎臟、腸道、鰓、腦、心

3、臟、肌肉和皮膚中均有表達(dá)，并且在腎臟中的的表達(dá)水平最高。
　　3.溫和氣單胞菌感染斑馬魚(yú)后，用qRT-PCR方法檢測(cè)到其免疫相關(guān)組織（肝臟、脾臟、腎臟和腸道）中的zfMR和炎癥因子（IL-1β和TNF-α）mRNAs的表達(dá)量均有上調(diào)。免疫組織化學(xué)分析表明，斑馬魚(yú)的脾臟和腸道的zfMR蛋白表達(dá)有輕微的增加，表明zfMR在抵抗細(xì)菌感染的先天性免疫調(diào)節(jié)中扮演一定的角色。
　　本論文建立了斑馬魚(yú)-溫和氣單胞菌感染模型，可以為進(jìn)一步研