川芎嗪對內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、第一部分川芎嗪對脂多糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞IL-8的表達(dá)的影響
　　 目的：探討川芎嗪對脂多糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)IL-8的影響。
　　 方法：川芎嗪預(yù)處理細(xì)胞后，用脂多糖刺激細(xì)胞，采用RT-PCR，ELISA，Western blot以及免疫熒光的方法檢測川芎嗪對脂多糖誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)IL-8的影響，并探討相關(guān)機(jī)制，以及藥物干預(yù)脂多糖對趨化單核細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞聚集的影響。
　　 結(jié)果：川芎嗪抑制脂多糖誘導(dǎo)的細(xì)

2、胞中ERK，P38的磷酸化和NF-kB的核轉(zhuǎn)位，減弱IL-8 mRNA，IL-8蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。用P38磷酸化的抑制劑SB203580（25μM）可以阻斷脂多糖誘導(dǎo)的IL-8的合成以及對NF-kB的激活。此外，脂多糖誘導(dǎo)的IL-8的表達(dá)也可被PD98059（30μM）（ERK磷酸化抑制劑）所抑制。川芎嗪也可以抑制脂多糖誘導(dǎo)的U937單核細(xì)胞向內(nèi)皮組織的聚集。
　　 結(jié)論：川芎嗪可能通過阻斷ERK、P38、NF-kB通路來抑制

3、脂多糖誘導(dǎo)的IL-8的合成，川芎嗪抑制單核細(xì)胞向內(nèi)皮組織的聚集可能是通過抑制趨化因子的產(chǎn)生達(dá)到的。因此，川芎嗪在治療心血管疾病方面展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。
　　 第二部分川芎嗪對脂多糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)IL-6的影響
　　 目的：探討川芎嗪對脂多糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞IL-6表達(dá)的影響和相關(guān)機(jī)制。
　　 方法：細(xì)胞在川芎嗪預(yù)處理后與脂多糖孵育，采用RT-PCR，Westernblot，ELISA的方法檢測

4、川芎嗪對IL-6表達(dá)的影響及具體的調(diào)控機(jī)制。
　　 結(jié)果：川芎嗪有效的抑制了IL-6蛋白和mRNA的表達(dá)。川芎嗪對P38、ERK、PI3K/AKT激酶磷酸化的抑制作用也可以抑制脂多糖誘導(dǎo)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞IL-6蛋白的表達(dá)。川芎嗪還通過降解IkBα作用拮抗脂多糖誘導(dǎo)的NF-kB的核轉(zhuǎn)位。LY294002（PI3K的抑制劑）可以抑制IkBα的降解，說明PI3K/AKT是NF-kB上游因子。此外，脂多糖誘導(dǎo)的AKT的磷酸化可被P38抑