甘肅黃芪黃酮化合物對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù).pdf

1、目的：觀察甘肅黃芪黃酮化合物芒柄花素與毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖對(duì)血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)損傷的保護(hù)作用。 方法：體外培養(yǎng)HUVECs，MTT比色法測(cè)定芒柄花素(0.01，0.1，1.0，10mg·L-1)與毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖(0.01，0.1，1.0，10mg·L-1)對(duì)培養(yǎng)HUVECs存活率的影響；Hoechst33258熒光染色法觀察細(xì)胞核形態(tài)變化；流式細(xì)胞

2、儀及激光共聚焦儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，并觀察凋亡基因Fas表達(dá)；采用分光光度計(jì)測(cè)定培養(yǎng)的HUVECs乳酸脫氫酶(LDH)漏出；硝酸還原酶法和放射免疫分析技術(shù)分別測(cè)定HUVECs上清液中一氧化氮(NO)和內(nèi)皮素-1(ET-1)的含量。 結(jié)果：AngⅡ(10-6mol·L-1)孵育24h后HUVECs凋亡明顯多于對(duì)照組(67.97±7.82vs2.69±0.25，P=0.000)；芒柄花素(1.0mg·L-1、10mg·L-1)組與毛蕊異黃

3、酮-7-0-β-D-吡喃葡萄糖(1.0mg·L-1、10mg·L-1)組HUVECs存活率顯著高于AngⅡ組(分別為：0.7025±0.0091vs0.6843±0.0057，P=0.005；0.7128±0.0062vs0.6843±0.0057，P=0.000；0.7003±0.0081vs0.6843±0.0057，P=0.012；0.7095±0.0067vs0.6843±0.0057，P=0.000)；芒柄花素(1.0mg·L

4、-1、10mg·L-1)兩組間與毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖(1.0mg·L-1、10mg·L-1)兩組間細(xì)胞存活率無(wú)明顯差異(分別為：(0.7025±0.0091vs0.7128±0.0062，P=0.094；0.7003±0.0081vs0.7095±0.0067，P=0.129)；芒柄花素(1.0mg·L-1)與毛蕊異黃酮-7-0-β-D-吡喃葡萄糖(1.0mg·L-1)可顯著抑制AngⅡ(10-6mol·L-1)誘導(dǎo)的

5、內(nèi)皮細(xì)胞凋亡(分別為：42.13±5.55vs2.69±0.25，P=0.000；47.17±5.81vs2.69±0.25，P=0.000)，并減少Fas的表達(dá)(分別為：65.63±5.01vs79.90±6.56，P=0.011；69.07±6.50vs79.90±6.56，P=0.037)。同時(shí)芒柄花素(1.0mg·L-1)與毛蕊異黃酮-7-0-β-D-吡喃葡萄糖(1.0mg·L-1)抑制AngⅡ(10-6mol·L-1)的促LD

6、H漏出(480.28±102.35vs1543.85±411.78，P=0.000；471.58±70.43vs1543.85±411.78，P=0.000)和ET-1分泌(46.92±5.41vs81.45±8.9，P=0.000；47.89±8.56vs81.45±8.9，P=0.000)，促進(jìn)HUVECs的NO釋放(37.34±5.01vs27.33±5.63，P=0.017；36.32±5.12vs27.33±5.63，P=0.

7、028)；以上實(shí)驗(yàn)芒柄花素(1.0mg·L-1)與毛蕊異黃酮-7-0-β-D-吡喃葡萄糖(1.0mg·L-1)兩化合物間比較無(wú)顯著差異，兩組間MTT、細(xì)胞凋亡率、Fas的表達(dá)、NO、ET-1和LDH的含量分別為0.7025±0.0091vs0.7003±0.0081，P=0.707；42.13±5.55vs47.17±5.81，P=0.304；65.63±5.01vs69.07±6.50，P=0.451；37.34±5.01vs36.3