自體平滑肌細(xì)胞移植到心肌缺血區(qū)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該研究從S-D大鼠的輸精管組織中分離、提取SMC,體外培養(yǎng)、擴(kuò)增,然后將SMC自體移植到冠狀動(dòng)脈結(jié)扎法后2周形成的心肌梗死瘢痕組織中,研究?jī)?nèi)容包括:(1)自體SMC移植到缺血模型心肌瘢痕區(qū)的可行性.(2)自體SMC移植后促進(jìn)心功能的作用.(3)自體SMC移植的長(zhǎng)期效果觀察.(4)初步探討自體SMC移植提高心功能的機(jī)理,為將來過渡到臨床提供更充足的理論依據(jù).主要研究方法:1.自體SMC的提取、培養(yǎng)、鑒定及標(biāo)記;用酶消化法從S-D大鼠輸精管

2、組織中分離、提取SMC,體外培養(yǎng)、擴(kuò)增4周.用抗平滑肌特異性的α-SMA單克隆抗體作免疫組化染色,鑒定培養(yǎng)的細(xì)胞.移植前用細(xì)胞核標(biāo)記物——BrdU標(biāo)記培養(yǎng)的細(xì)胞,并用免疫組化染色的方法觀察標(biāo)記效果.2.大鼠心肌缺血模型的建立;用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支的方法引起心肌梗塞,建立大鼠心肌缺血模型,通過B超聲心功能檢查、心臟標(biāo)本病理檢查結(jié)合圖像分析系統(tǒng),觀察心肌缺血模型的制作效果.3.自體SMC移植到心肌缺血區(qū)的實(shí)驗(yàn)研究;動(dòng)物隨機(jī)分為四組,組Ⅰ(細(xì)

3、胞移植治療4周組,n=12),組Ⅱ(細(xì)胞移植治療24周組,n=11),組Ⅲ(4周對(duì)照組,n=10)和組Ⅳ(24周對(duì)照組,n=12).組Ⅰ和組Ⅱ,將自體SMC細(xì)胞懸液(200μl,含細(xì)胞數(shù)4×10<'6>),直接注射移植到冠狀動(dòng)脈結(jié)扎后2周形成的心肌梗死瘢痕組織中;組Ⅲ和組Ⅳ,用相同的方法注射變量、不含血清的DMEM培養(yǎng)液.用B超檢查評(píng)價(jià)心功能,心臟標(biāo)本進(jìn)行病理學(xué)檢查結(jié)合圖像分析系統(tǒng),觀察移植后SMC在心肌梗死瘢痕中的存活情況,瘢痕心室壁

4、的厚度,梗死范圍的大小,瘢痕組織中血管新生情況以及對(duì)心功能提高的作用.主要結(jié)論:1.自體SMC移植到缺血模型的心肌梗死區(qū)后,能在瘢痕組織內(nèi)存活并提高心功能,移植SMC治療心肌缺血是可行的.2.移植的自體SMC能在心肌瘢痕組織長(zhǎng)期存活,對(duì)改善缺血模型的心功能有長(zhǎng)期效果.3.移植自體SMC通過增厚心室壁,促進(jìn)梗死區(qū)內(nèi)血管新生,改善心室壁局部血運(yùn)和順應(yīng)性,縮小心肌梗死面積,防止心腔進(jìn)行性擴(kuò)大,抑制心肌梗死后心室重構(gòu)的進(jìn)展,有效的提高了心功能.