大鼠嚴(yán)重?zé)齻蠼Y(jié)腸平滑肌及其小動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、多器官功能障礙綜合征 (Multiple Organ Dysfunction Syndrome，MODS) 是嚴(yán)重?zé)齻饕劳鲈蛑?，現(xiàn)已證實(shí)缺血缺氧是導(dǎo)致嚴(yán)重?zé)齻嗯K器損害的主要始動(dòng)因素之一，腸道是對(duì)缺血、缺氧損害最為敏感的器官之一，缺血缺氧導(dǎo)致細(xì)胞氧利用及能量代謝障礙，并可進(jìn)一步導(dǎo)致失控性炎癥反應(yīng)，最后導(dǎo)致細(xì)胞功能的廣泛損害，使之產(chǎn)生凋亡或死亡。且嚴(yán)重?zé)齻?，由于腸粘膜屏障損害、免疫功能抑制和腸道菌群紊亂，腸道中的細(xì)菌和內(nèi)毒素可通

2、過(guò)受損的腸粘膜屏障侵入到體循環(huán)和其它臟器，形成腸源性感染。進(jìn)一步發(fā)展可成為全身炎癥反應(yīng)綜合征(SystemicInflammatory Response Syndrome，SIRS)乃至MODS的始動(dòng)因素。目前，燒傷后臟器早期損害的防治研究主要集中于對(duì)減輕燒傷早期腸粘膜損害，保護(hù)腸粘膜屏障功能的探討，其關(guān)鍵問(wèn)題是盡快恢復(fù)受損的組織細(xì)胞的功能，對(duì)嚴(yán)重?zé)齻皺C(jī)體應(yīng)激反應(yīng)過(guò)程中腸道本身的結(jié)構(gòu)和功能改變的研究也逐漸重視起來(lái)。 機(jī)體在正常

3、情況下，循環(huán)血流的30％流經(jīng)胃腸道。當(dāng)機(jī)體受到嚴(yán)重?zé)齻踔涟l(fā)生休克時(shí)，全身血液重新分配，胃腸道血流明顯減少，最早發(fā)生缺血缺氧，腸絨毛發(fā)生缺血性損害，上皮細(xì)胞水腫壞死，腸通透性增加，發(fā)生細(xì)菌毒素移位，產(chǎn)生腸源性感染。嚴(yán)重?zé)齻瑫r(shí)導(dǎo)致胃腸運(yùn)動(dòng)障礙，早期胃排空及腸道推進(jìn)功能明顯下降，胃腸道及其血管平滑肌是胃腸動(dòng)力的基礎(chǔ)和源泉，胃腸平滑肌節(jié)律性的收縮、舒張維持胃腸道消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、排泄廢物等正常生理功能。血管平滑肌細(xì)胞與血管的結(jié)構(gòu)及功能變化密

4、切相關(guān)，關(guān)于嚴(yán)重?zé)齻笪改c道及其血管平滑肌的變化規(guī)律，目前尚不明確，本課題擬通過(guò)燒傷大鼠模型，研究嚴(yán)重?zé)齻笪改c運(yùn)動(dòng)功能的改變和腸道平滑肌細(xì)胞及其粘膜下小動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的變化規(guī)律。旨在探討腸道平滑肌及其粘膜下小動(dòng)脈血管平滑肌肌動(dòng)蛋白在燒傷后胃腸運(yùn)動(dòng)變化中的作用，為進(jìn)一步研究改善燒傷后胃腸運(yùn)動(dòng)功能，防治腸源性感染提供一個(gè)新的思路。 一、材料與方法: 1．采用大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，檢測(cè)傷后1、2、6、1

5、2、24、48、72h不同時(shí)相點(diǎn)炭末膠液灌胃后的炭末推進(jìn)率，了解燒傷后胃腸運(yùn)動(dòng)功能的變化情況。 2．采用大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，取材傷后1、2、6、12、24、48、72h不同時(shí)相點(diǎn)結(jié)腸標(biāo)本，采用免疫組化方法檢測(cè)結(jié)腸平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)。 3．采用大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，取材傷后1、2、6、12、24、48、72h不同時(shí)相點(diǎn)結(jié)腸標(biāo)本，采用免疫組化方法檢測(cè)結(jié)腸粘膜下小動(dòng)脈血管平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)。

6、二、主要結(jié)果: 1．大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，傷后1、2、6、12、24、48、72h不同時(shí)相點(diǎn)，炭末膠液灌胃后的炭末推進(jìn)率分別為72.81％、54.11％、38.52％、47.32％、40.01％、45.86％、42.46％，正常對(duì)照組炭末推進(jìn)率74.20％。 2．大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，傷后1、2、6、12、24、48、72h不同時(shí)相點(diǎn)，取材大鼠近回盲部結(jié)腸組織，包埋切片，采用SABC法免疫組化技術(shù)檢測(cè)

7、腸壁組織平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)。傷后2h粘膜下肌層平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)下降，傷后6h表達(dá)最低(PU值5.335)，傷后12h-24h平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)上升，傷后48h平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)再次下降，傷后72h平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)再次上升。而腸壁組織平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)變化略小，同樣呈先降低后升高，再降低又升高，表達(dá)最低在傷后48h(PU值2.755)。 3．大鼠Ⅲ°30％TBSA燒傷模型，傷后1、2、6、12、24、48、72h不

8、同時(shí)相點(diǎn)，取材大鼠近回盲部結(jié)腸組織，包埋切片，采用SABC法免疫組化技術(shù)檢測(cè)粘膜下小動(dòng)脈血管平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)。其表達(dá)在傷后2h開(kāi)始升高，傷后12h最高(PU值9.84)，并持續(xù)到傷后24h，傷后48h血管平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)降至(PU值4.005)最低伴隨血管平滑肌內(nèi)膜下增生，傷后72h血管平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)再次升高。 三、結(jié)論: 1．大鼠燒傷后炭末膠液灌胃后的炭末推進(jìn)率較正常對(duì)照組炭末推進(jìn)率明顯降低，傷后6小時(shí)起

9、尤為明顯，傷后72小時(shí)仍未見(jiàn)恢復(fù)跡象，表明燒傷后胃腸運(yùn)動(dòng)功能受到明顯抑制。 2．大鼠燒傷后腸壁及粘膜下肌層平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)先降后升再降又升，平滑肌由收縮表型轉(zhuǎn)化為合成表型，并相互轉(zhuǎn)化，使平滑肌組織正常的收縮功能降低恢復(fù)又降低再恢復(fù)。 3．大鼠燒傷后24小時(shí)內(nèi)，血管平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)先升高，血管平滑肌收縮，血管管腔變窄，傷后48小時(shí)血管平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)降至最低，然后再次升高。 根據(jù)上述結(jié)果，作出以下結(jié)論或