飲食中亞硝酸鹽對(duì)大鼠肝缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠肝臟缺血再灌注模型，觀察飲食中亞硝酸鹽對(duì)大鼠肝臟急性缺血再灌注損傷的影響，并測(cè)定肝臟急性損傷血清指標(biāo)及脂質(zhì)氧化相關(guān)因子，探討飲食中亞硝酸鹽發(fā)揮的可能機(jī)制，從而為急性肝臟缺血再灌注損傷臨床干預(yù)及預(yù)防提供依據(jù)。
　　 方法：健康SPF級(jí)Wistar大鼠24只，雌雄不限，體重在280g-330g，普食喂養(yǎng)一周，隨機(jī)分三組（每組8只）。參照Ohmori方法建立動(dòng)物模型，假手術(shù)組：進(jìn)腹后僅解剖肝門，不阻斷血管；對(duì)照

2、組：阻斷大鼠肝左葉和中葉的門靜脈、肝動(dòng)脈，保留肝右葉和尾葉的血流，避免門靜脈系統(tǒng)淤血，阻斷持續(xù)40min后，開放動(dòng)脈夾，恢復(fù)阻斷肝葉的血供，制成70％的肝缺血再灌注模型；實(shí)驗(yàn)組：用每1000ml去離子水加1g分析純亞硝酸鈉喂養(yǎng)7天后按照對(duì)照組的方法手術(shù)。各組再灌注3小時(shí)后從下腔靜脈抽取血液，用于測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)的水平。取適量肝臟分成幾等分放入凍存管存于-80℃冰箱，用于檢測(cè)肝組織中超氧化物歧化

3、酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)含量及活性。取肝左葉組織少許用10％的甲醛固定并脫水做成蠟塊，用Hoechst染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡，并對(duì)比觀察病理形態(tài)學(xué)改變。對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件，各指標(biāo)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示。資料先經(jīng)過正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布且方差齊的采用單因素方差分析，否則采用秩和檢驗(yàn)。P＜0.01為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1血

4、清ALT、AST：與假手術(shù)組相比，對(duì)照組和亞硝酸鹽組的ALT、AST的水平都高，但亞硝酸鹽組的水平明顯低于對(duì)照組，其差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)
　　 2肝組織SOD活性和MDA含量：亞硝酸鹽組和對(duì)照組的SOD活性都比假手術(shù)組低，亞硝酸鹽組SOD活性明顯高于對(duì)照組。與假手術(shù)組相比，對(duì)照組和亞硝酸鹽組MDA的含量均升高，但亞硝酸鹽組的水平明顯低于對(duì)照組，其差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)
　　 3肝組織NO含量及N

5、OS活性：對(duì)照組NO含量比假手術(shù)組明顯低，亞硝酸鹽組NO含量卻高于對(duì)照組，其差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)，亞硝酸鹽組與假手術(shù)組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.019)。對(duì)照組和亞硝酸鹽組NOS活性低于假手術(shù)組，其差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)，對(duì)照組與亞硝酸鹽組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.96)
　　 4細(xì)胞凋亡：與假手術(shù)組相比，對(duì)照組和亞硝酸鹽組調(diào)亡指數(shù)相對(duì)較高，但實(shí)驗(yàn)組要比對(duì)照組較低，其差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)