端粒酶活性的檢測方法及應用研究.pdf

1、華中科技大學同濟醫(yī)學院博士學位論文端粒酶活性的檢測方法及應用研究姓名：何敏申請學位級別：博士專業(yè)：勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學指導教師：周宜開徐順清2001.4.1半中科或丈學周，嚌壓學臃搏窖學芷般斷標記物的特異性為91％，敏感性為85％。而正常體細胞(除外生殖細胞及造血干細胞)檢測不到端粒酶活性或僅檢測到低水平的端粒酶活性。探測細胞內(nèi)端粒酶活性需要有靈敏準確的測定方法。近年來建立的TRAP(telomericrepeatamplificati

2、onprotoc01)法以PCR技術放大端粒酶反應產(chǎn)物的量，大大提高提高檢測的靈敏度。目前應用最廣的端粒酶活性分析方法就是以TRAP法為基礎的各種方式。但總的來說還缺乏靈敏度和特異性高，定量準確的檢測端粒酶活性的方法。建立端粒酶的準確定量系統(tǒng)和量化各種正常與腫瘤組織端粒酶表達，是在臨床應用端粒酶作為腫瘤診斷和判斷預后的關鍵。目前有許多生物技術及制藥公司正在以端粒酶為靶點，發(fā)掘端粒酶抑制劑作為治療腫瘤的有效藥物。端粒酶是目前已知的最為廣譜

3、的腫瘤分子標記、物，并且有可能成為腫瘤治療的新靶點。對端粒酶的研究還處在方興未艾之際廠7第二章端粒酶活性定性檢測方法的研究目的：探討TRAP銀染法、TRAPSYBRGreen染色法定性檢測端粒酶活性的方法，以及利用適配分子(Aptamer)提高TRAP法檢測靈敏度的可能。(方法：采用TRAP銀染法定性檢測293細胞株、白血病細胞株及不同陰性對照組標本的端粒酶活性；采用TRAPSYBRGreen染色法檢測A549肺腺癌細胞株、293細胞株