端粒酶測(cè)定方法的建立及食管癌與端粒酶相關(guān)關(guān)系的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文端粒酶測(cè)定方法的建立及食管癌與端粒酶相關(guān)關(guān)系的研究姓名:張傳寶申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師:張克堅(jiān)郭健2002.1.1行了端粒酶活性測(cè)定。結(jié)果:1我們選擇的TRAP方法:i、延伸條件:25oC水浴30分鐘:ii、火活端粒酶:90oc保溫3分鐘:ii、PCR條件:900C/45秒,50oC/45秒,72oC/60秒,循環(huán)35次;iii電泳條件:15%聚丙烯酰胺電泳,電壓為150V

2、;2確定的銀染方法:i小心取下凝膠,在100ml的固定液(1O%乙醇,05%乙酸)中固定10分鐘;ii在固定液中加入06%的硝酸銀溶液50ml,使終濃度為02%,染色l0分鐘;iii棄去固定液,用蒸餾水漂洗兩次:一次20秒,一次2分鐘;iii加入200ml冠色液(3%NaOH,05%甲醛)輕輕晃動(dòng),直至產(chǎn)物信號(hào)足夠強(qiáng)而背景不致過(guò)高為止:iv用100ml固定液固定5分鐘,終止反應(yīng),蒸餾水漂沈10分鐘,照相保存Y/結(jié)合TRAP和銀染建立了測(cè)

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