硒鋅鉛對細(xì)胞端粒和端粒酶的作用及機(jī)理研究.pdf

1、本文以人胎肝細(xì)胞L-02和人肝癌細(xì)胞SMMC-7721為模型，采用噻唑藍(lán)（MTT）比色法和細(xì)胞形態(tài)觀察法獲得作用于細(xì)胞的硒和鋅的最佳濃度以及鉛的濃度，通過端粒重復(fù)序列擴(kuò)增－焦磷酸根酶聯(lián)發(fā)光技術(shù)（TRAP-ELIDA）檢測端粒酶活性，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）法檢測人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）基因表達(dá)水平，流式熒光原位雜交法（FLOW-FISH）檢測端粒長度，并測定了細(xì)胞內(nèi)丙二醛（MDA）含量、巰基含量、谷胱甘肽過氧化物酶（

2、GPx）活性和總的超氧化物歧化酶（T-SOD）活性，研究硒、鋅和鉛對細(xì)胞端粒酶活性、端粒長度的作用以及與細(xì)胞氧化還原水平的關(guān)系。文中還研究了燈盞花素對過量硒造成的人胎肝細(xì)胞毒性的拮抗作用。實驗結(jié)果表明0.5 mmol/L燈盞花素在與L-02細(xì)胞作用48 h后對細(xì)胞生長的促進(jìn)作用達(dá)到最佳效果，該濃度的燈盞花素可以顯著性拮抗5 mmol/L硒對細(xì)胞生長的抑制作用,提示燈盞花素通過抗氧化、提高細(xì)胞巰基含量及總抗氧化能力，來拮抗過量硒對人正常