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1、血管生成素樣蛋白4(Angiopoietin-like protein4,ANGPTL4)類血管生成素基因是與脂肪代謝相關(guān)的分泌蛋白,而且ANGPTL4基因不僅調(diào)節(jié)脂肪和能量代謝,還參與到細(xì)胞增殖和凋亡調(diào)控以及控制肌肉生長(zhǎng)過程,由此在肌肉生長(zhǎng)發(fā)育過程中發(fā)揮著重要的作用。本試驗(yàn)選取天府黑兔、伊拉兔和新西蘭兔為試驗(yàn)材料,通過PCR產(chǎn)物直接測(cè)序法檢測(cè)ANGPTL4基因編碼區(qū)SNPs位點(diǎn),通過連鎖不平衡分析和PCR-RFLP技術(shù)對(duì)遺傳突變位點(diǎn)進(jìn)
2、行基因分型,并將SNPs位點(diǎn)與家兔生長(zhǎng)性狀進(jìn)行相關(guān)性分析。主要結(jié)果如下:
1.通過對(duì)天府黑兔、新西蘭兔和伊拉兔三個(gè)品種在35、70和84日齡的生長(zhǎng)性狀進(jìn)行比較后,結(jié)果表明三個(gè)品種之間差異不顯著,但是多重比較表明天府黑兔在70日齡和84日齡體重顯著高于伊拉兔(P<0.05);新西蘭兔在28日齡體重顯著高于伊拉兔(P<0.05),并且在35日齡體重高于其它品種;新西蘭兔在70、84日齡體重均高于伊拉兔。不同家兔品種之間在28~84
3、日齡平均日增重差異不顯著,但天府黑兔平均日增重高于新西蘭兔和伊拉兔;新西蘭兔高于伊拉兔。
2.在ANGPTL4基因外顯子6中共檢測(cè)出3個(gè)SNP位點(diǎn),其中一個(gè)為錯(cuò)義突變,其它兩個(gè)是同義突變,分別為:c.827 G>A、c.867 T>C和c.975 T>C。通過SMART在線分析軟件預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域發(fā)現(xiàn)這三個(gè)位點(diǎn)均位于FBG結(jié)構(gòu)域上。然后通過連鎖不平衡分析表明c.827 G>A與其它兩個(gè)SNPs位點(diǎn)高度連鎖(r2≥0.75),由
4、此可以選擇c.827 G>A位點(diǎn)作為遺傳效應(yīng)分析位點(diǎn),進(jìn)行后續(xù)基因多態(tài)性研究。
3.在3個(gè)家兔品種群體內(nèi),對(duì)c.827 G>A位點(diǎn)進(jìn)行基因分型,檢測(cè)到三個(gè)家兔群體內(nèi)AA、AG和GG三種基因型,均為中度多態(tài)(0.25<PIC<0.50); x2檢驗(yàn)表明c.827 G>A位點(diǎn)在三個(gè)家兔群體內(nèi)處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05)。
4.ANGPTL4基因的c.827 G>A位點(diǎn)與生長(zhǎng)性狀關(guān)聯(lián)分析表明在三
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