微囊化許旺細胞移植脊髓損傷大鼠bFGF表達及后肢運動功能變化.pdf

1、目的:細胞移植是目前脊髓損傷治療的重要研究方向。在脊髓半橫段損傷后的大鼠,移植具有免疫隔離效應(yīng)的兔許旺細胞微囊,通過觀察大鼠堿性成纖維細胞生長因子表達及后肢運動功能的變化,探討微囊化許旺細胞移植對脊髓再生的影響。
　　 方法:在無菌條件下,取家兔坐骨神經(jīng)用雙酶消化法制成許旺細胞懸液后,再用氣體噴入法制成許旺細胞微囊。同法制備不包被許旺細胞的空囊。80只SD大鼠隨機分為4組:細胞組(N=25)、空囊組(N=25)、微囊組(N=25

2、)和正常組(N=5)。其中,前三組建立第10胸椎脊髓右半橫斷損傷模型,分別于損傷處植入明膠海綿吸附的10μL許旺細胞懸液(細胞組)、10μL空囊(空囊組)、10μL許旺細胞微囊(微囊組);正常組不做任何干預(yù)。采用BBB評分測定大鼠后肢運動功能恢復(fù)情況和制作脊髓石蠟切片觀察實驗動物。術(shù)后第1、3、7、14、28 d大鼠4％多聚甲醛灌注后,細胞組、空囊組、微囊組截取損傷平面脊髓;正常組取相應(yīng)部位脊髓,四組大鼠脊髓組織均制成常規(guī)石蠟切片。切片

3、通過HE染色和尼氏染色行病理學(xué)檢查,并做免疫組織化學(xué)染色,結(jié)合圖像分析觀察堿性成纖維細胞生長因子在脊髓損傷部位的表達變化。
　　 結(jié)果:造模后大鼠右后肢即刻出現(xiàn)癱瘓,BBB評分為0。術(shù)后隨時間延長各組動物后肢運動功能均有不同程度的恢復(fù),但都未達到正常水平。移植后第7、14、28天微囊組大鼠后肢運動功能恢復(fù)較快,BBB評分優(yōu)于細胞組和空囊組(P＜0.05或P＜0.01)。病理學(xué)檢查,移植后第3天,各組脊髓損傷區(qū)有大量巨噬細胞和白細

4、胞浸潤,同時膠質(zhì)細胞增生,但與細胞組、空囊組比較,微囊組細胞浸潤程度較輕,膠質(zhì)細胞增生明顯。材料移植后第7天,微囊組大量膠質(zhì)細胞增生,已無白細胞和巨噬細胞浸潤,而細胞組、空囊組仍有白細胞和巨噬細胞浸潤。堿性成纖維細胞生長因子陽性細胞表達主要見于神經(jīng)元細胞的胞漿和膠質(zhì)細胞的胞核內(nèi)。移植后第1、3、7天,膠質(zhì)細胞主要在脊髓損傷附近處表達,其中第3天表達量最大;第14天在神經(jīng)元細胞的胞漿內(nèi)可見堿性成纖維細胞生長因子表達,微囊組表達程度明顯高于