大鼠羊膜上細(xì)胞移植對(duì)損傷脊髓GAP-43表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]
　　 通過(guò)檢測(cè)大鼠羊膜上皮細(xì)胞(rat amniotic epithelial cells，RAECs)移植治療脊髓損傷(spinal cord injury，SCI)后GAP-43表達(dá)量的變化，來(lái)探討其在損傷脊髓再生中的作用機(jī)理。
　　 [方法]
　　 采用改良-Allen撞擊法，以致傷能量300gcm，選擇T10為撞擊部位，建立大鼠SCI模型。原代培養(yǎng)技術(shù)分離和培養(yǎng)大鼠羊膜上皮細(xì)胞，對(duì)其進(jìn)行神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)

2、因子(BDNF、NT-3)的免疫熒光細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。用Hoaest33342標(biāo)記RAECs，將其移植入脊髓損傷部位，觀察細(xì)胞移植后存活與遷移情況。通過(guò)采用運(yùn)動(dòng)功能測(cè)評(píng)系統(tǒng)(BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分)來(lái)評(píng)價(jià)大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)的情況。用Glees-Marland’s鍍銀染色觀察AECs移植組(AECs graft group)與鹽水對(duì)照組(NScontrol group)損傷灶處的病理變化及軸突再生的情況。分別于移植后第7、14和28天，通過(guò)免疫

3、組織化學(xué)技術(shù)以及Western-Blot方法，比較AECs移植組與NS對(duì)照組GAP-43蛋白的表達(dá)量。
　　 [結(jié)果]
　　 RAECs表達(dá)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNF、NT-3抗原，移植到損傷脊髓后能長(zhǎng)期存活，并與宿主整合良好，無(wú)免疫排斥反應(yīng)；大鼠羊膜上皮細(xì)胞能促進(jìn)脊髓功能的恢復(fù)及軸突的再生，移植后28天BBB評(píng)分檢測(cè)結(jié)果，AECs移植組(8.26±0.89)明顯好于NS對(duì)照組(4.98±1.03)(P<0.01)；免疫組化及