幾種中草藥活性成分與蛋白質相互作用的研究.pdf

1、蛋白質是生命科學的重要研究對象，從細胞分裂到細胞運動，從代謝到免疫，已知的生物功能沒有一個是離開蛋白質能實現的。而作為藥物的一種非常重要的運輸載體，蛋白質與藥物的相互作用不僅影響藥物在體內分布，而且還影響藥物在體內的代謝與排泄方式；從藥物的有效性來看，僅僅是未與蛋白質發(fā)生作用的部分具有生物活性，而且藥物的藥代動力學行為很大程度依賴于鍵合現象，因此研究藥物與蛋白質的相互作用已成為生命科學、化學和臨床醫(yī)學研究領域的重要研究課題之一。本文在總

2、結前人工作的基礎上，利用熒光光譜、紫外-可見光譜及紅外光譜技術對一些中藥活性成分與血清白蛋白和溶菌酶的相互作用進行了研究，從分子水平上闡明此中藥活性成分與蛋白的作用機制，以期為新藥的設計與合成提供理論指導。 論文共分為六個部分，主要結論總結如下： 1.簡要概述和總結了國內外藥物小分子-生物大分子相互作用的研究現狀，并著重敘述了熒光光譜法、紫外-可見分光光度法及紅外光譜技術在本研究領域的應用情況，為本論文的展開鋪墊了理論依

3、據。 2.應用熒光光譜、紫外-可見光譜技術研究了生理酸度(pH=7.4)條件下橙皮苷或淫羊藿苷與溶菌酶的相互作用。研究發(fā)現，橙皮苷或淫羊藿苷對溶菌酶內源性熒光產生強烈的猝滅作用，測定了不同溫度下橙皮苷或淫羊藿苷與溶菌酶反應的猝滅常數，得出橙皮苷對溶菌酶的熒光猝滅過程為動態(tài)猝滅，淫羊藿苷對溶菌酶的熒光產生靜態(tài)和動態(tài)并存的復合猝滅方式。反應的熱力學參數表明，橙皮苷與溶菌酶的作用力是以疏水作用為主，而淫羊藿苷與溶菌酶的作用力主要是靜電

4、引力；同步熒光、三維熒光研究表明橙皮苷、淫羊藿苷能夠使溶菌酶的構象發(fā)生變化。 3.將結構相似的三種黃酮小分子白楊素、芹菜素和桑色素作為研究對象，應用紫外-可見光譜、共振Rayleigh散射光譜、熒光偏振光譜、同步熒光光譜等對這三種黃酮類化合物與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用分別進行了系統(tǒng)的研究，探討了與BSA作用過程中由藥物分子結構變化所體現的構效關系。研究結果表明，藥物小分子結構的變化，對其與蛋白質相互作用產生影響。對三種黃

5、酮小分子而言，分子結構中的C4'-OH、C2'-OH、C3-OH可能分別是與BSA分子間結合的作用基團，它們對藥物-BSA相互作用過程具有促進或阻礙作用。 4.考察了具有生理活性意義的4種金屬離子Ca2+、Mg2+、Cu2+、Zn2+對三種黃酮小分子-BSA結合過程的影響，研究了其在中藥小分子-BSA相互作用過程中表現出的生物無機化學效應。 5.探討了其它典型來源和用途的4種外加劑如：碘、亞硝酸鈉、葡萄糖及維生素C對三種

6、黃酮小分子-BSA結合作用的影響及可能的參與方式，初步歸納了外加劑對中藥小分子-BSA相互作用過程的擾動方式和可能的擾動機制。 6.詳細研究了中藥活性成分牛蒡苷與人血清白蛋白(HSA)和溶菌酶相互作用的熒光增強效應，并測定了不同溫度下的結合常數；應用熒光偏振技術分析了藥物與蛋白質的作用情況；利用范德霍夫方程計算了反應的熱力學參數，確定了不同藥物-蛋白質體系的作用力類型；同步熒光光譜、三維熒光光譜及傅立葉紅外光譜表明，牛蒡苷與蛋白