地衣芽孢桿菌H2對(duì)壞死性腸炎肉雞生長(zhǎng)性能及腸道菌群的影響.pdf

1、本研究以肉雞為對(duì)象，旨在研究日糧中添加地衣芽孢桿菌H2對(duì)壞死性腸炎肉雞生長(zhǎng)性能和腸道菌群的影響。
　　選取240只1日齡健康科寶-500肉雞，隨機(jī)分為4組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只，分別為空白對(duì)照組(NC組)，造模組（PC組），球蟲(chóng)魚(yú)粉消除組（FC組）和地衣芽孢桿菌防治組（BL組）。試驗(yàn)共持續(xù)22天，BL組在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中的日糧均添加0.1％活菌數(shù)為1.0×109CFU/mL的地衣芽孢桿菌H2全菌液。從14日齡起，除NC組繼續(xù)

2、飼喂日糧一外其余各組均飼喂日糧二，并于15日齡灌喂球蟲(chóng)（100萬(wàn)卵囊/mL，1.0mL/只）。18-20日齡，PC組和BL組肉雞連續(xù)灌喂1.0 mL/只活菌數(shù)為2.2×108CFU/mL產(chǎn)氣莢膜梭菌，其余各組肉雞灌喂相同劑量的生理鹽水。結(jié)果表明:
　　1.地衣芽孢桿菌H2的添加能顯著提高14日齡健康肉雞的體增重(P＜0.05)，22日齡時(shí)，壞死性腸炎的發(fā)生會(huì)顯著降低肉雞體增重并顯著升高肉雞料重比(P＜0.05)，地衣芽孢桿菌H2的

3、添加能提高壞死性腸炎肉雞的生長(zhǎng)性能。
　　2.PCR-DGGE檢測(cè)22日齡肉雞回腸和盲腸內(nèi)容物菌群，發(fā)現(xiàn)聚類分析和主成分(PCA)分析結(jié)果相一致，各組肉雞的回腸樣品主要聚為兩簇，BL組和NC組主要聚為一簇，PC組和FC組聚為一簇，其中PC組與NC組的最高相似性為0.70最低為0.64。各組盲腸樣品主要聚為兩簇，其中PC組樣品單獨(dú)聚為一簇，其余組樣品聚為另一簇。PC組與NC組的最高相似性僅有0.68，BL組與NC組的相似性在0.68

4、與0.83之問(wèn)，BL組樣品與空白對(duì)照組樣品條帶較PC組樣品更為相似，PC組條帶數(shù)量和位置與其他組不同，即菌群組成和結(jié)構(gòu)與其他組有較大差異。
　　3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)22日齡肉雞回腸和盲腸內(nèi)容物菌群，發(fā)現(xiàn)乳桿菌和腸桿菌等為肉雞回腸樣品中的優(yōu)勢(shì)菌群，其數(shù)量均達(dá)到了109CFU/g以上。各組在總細(xì)菌數(shù)量上無(wú)顯著差異(P＞0.05)。與NC組相比，PC組乳桿菌屬數(shù)量顯著下降(P＜0.05)，BL組乳桿菌屬數(shù)量與PC組相比顯著上升（P

5、＜0.05）且與NC組無(wú)顯著差異。與NC組相比，PC組中腸桿菌、梭菌類群Ⅳ、梭菌類群ⅩⅣa和擬桿菌門(mén)含量顯著升高(P＜0.05)，BL組中以上菌群含量下降且與NC組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。梭菌類群Ⅳ、梭菌類群ⅩⅣa等為肉雞盲腸樣品中的優(yōu)勢(shì)菌群，其數(shù)量均達(dá)到了1011CFU/g以上。與NC組相比，PC組在腸球菌的數(shù)量上無(wú)顯著差異，在總菌、腸桿菌、雙歧桿菌屬和梭菌類群ⅩⅣa的含量上顯著下降(P＜0.05)。與PC組相比，BL組在總菌、腸

6、桿菌和梭菌類群ⅩⅣa的含量上顯著上升(P＜0.05)且與NC組無(wú)顯著差異。與NC組相比，PC組中梭菌類群Ⅳ含量顯著下降(P＜0.05)，且該菌在BL和FC組中的含量與NC組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　4.Illumina MiSeq檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在回腸樣品中，本試驗(yàn)共獲得591010條序列，平均每個(gè)樣品序列數(shù)為24625條，獲得4854個(gè)物種分類的OTUs(Operational Taxonomic Units),平均每個(gè)樣品O

7、TUs為202個(gè)。在盲腸樣品中，本試驗(yàn)共獲得538091條序列，平均每個(gè)樣品序列數(shù)為22420條，共獲得11091個(gè)OTUs，平均每個(gè)樣品的OTUs為462個(gè)。在alpha多樣性指數(shù)中，回腸樣品趙氏指數(shù)的范圍為156.25～446.05，物種觀察指數(shù)范圍為96.00～305.30，香農(nóng)指數(shù)范圍為2.25～4.97，辛普森指數(shù)范圍為0.62～0.93。盲腸樣品趙氏指數(shù)范圍為163.08～757.31，物種觀察指數(shù)范圍為144.10～546

8、.60，香農(nóng)指數(shù)范圍為4.12～6.50，辛普森指數(shù)范圍為0.82～0.98。與回腸樣品相比，盲腸樣品的微生物群落多樣性高于回腸。且兩個(gè)部位的變化表明，壞死性腸炎導(dǎo)致的腸道菌群變化在腸段不同部位有所不同。肉雞回腸和盲腸微生物菌群OTU相對(duì)豐度的分析表明，在盲腸門(mén)水平微生物菌群中，PC組肉雞擬桿菌門(mén)的百分含量比NC組肉雞減少且差異顯著(P＜0.05)，飼喂地衣芽孢桿菌H2的BL組能提高擬桿菌門(mén)的含量，且與NC組無(wú)顯著差異(P＞0.05)，

9、其余門(mén)水平微生物群落在各組無(wú)顯著差異。在屬水平的優(yōu)勢(shì)菌群中，回腸樣品的紫單胞菌屬和鏈球菌屬的百分比數(shù)量在組與組之間有顯著差異。其中PC組紫單胞菌屬的數(shù)量顯著高于NC組，而鏈球菌屬的數(shù)量顯著低于NC組(P＜0.05)，在BL組或FC組中，這些菌群的百分比數(shù)趨于正常，且與NC組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。在盲腸樣品中，與NC組相比，PC組擬桿菌屬和Faecalibacterium菌屬的百分比含量上顯著降低，在乳桿菌屬和Dorea菌屬上顯著升