黃河蘭州段水體中有機(jī)污染物對(duì)MCF-7細(xì)胞周期和端粒酶表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本研究以黃河水中的有機(jī)污染物(Organic Pollutants)為研究對(duì)象，通過檢測(cè)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng)增殖抑制率、細(xì)胞周期、端粒酶活性的表達(dá)和細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子的濃度([Ca2+]i)，探討有機(jī)污染物的毒性作用及其機(jī)制。 方法：分別在黃河蘭州段中山橋(污染斷面)、什川橋(自凈斷面)和新城橋(清潔斷面)三個(gè)斷面進(jìn)行采樣，采用固相萃取法(SPE)對(duì)三個(gè)斷面水樣中的有機(jī)污染物進(jìn)行富集萃取。然后將MCF-7細(xì)胞分為不加任

2、何處理的對(duì)照組和經(jīng)不同濃度的有機(jī)污染物處理的實(shí)驗(yàn)組，應(yīng)用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)不同濃度有機(jī)污染物對(duì)細(xì)胞增殖活性及IC50的影響。在此基礎(chǔ)上，利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)有機(jī)污染物處理細(xì)胞48h后細(xì)胞周期分布和細(xì)胞凋亡率：逆轉(zhuǎn)錄端粒重復(fù)序列擴(kuò)增(PCR-TRAP)法檢測(cè)有機(jī)污染物對(duì)MCF-7細(xì)胞端粒酶活性表達(dá)的影響；激光共聚焦顯微鏡法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]i的濃度。 結(jié)論： 黃河蘭州段水體中有機(jī)污染物在一定濃度范圍對(duì)細(xì)胞有損傷作