洛鉑對(duì)MCF-7細(xì)胞凋亡及MTDH基因表達(dá)的影響.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  乳腺癌是危害婦女健康的最常見的惡性腫瘤,發(fā)病率高,晚期乳腺癌常常發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,是導(dǎo)致患者死亡的根本原因,因此抑制腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移對(duì)腫瘤患者的治療至關(guān)重要。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)MTDH基因在乳腺癌中過度表達(dá),是一種具有參考價(jià)值的預(yù)后分子。MTDH基因在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用,包括促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移、避免凋亡及使腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥。MTDH基因有望成為抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的有效靶點(diǎn)。
  鉑類是晚期乳腺

2、癌化療的常規(guī)用藥,以順鉑(cDDP)為基礎(chǔ)的化療已廣泛應(yīng)用在乳腺癌的治療中,并取得了一定的療效,但是由于順鉑嚴(yán)重的腎毒性和胃腸道反應(yīng)限制了它在臨床的應(yīng)用,因此開發(fā)高效低毒的鉑類藥物一直是學(xué)者們研究的目標(biāo)。洛鉑是第三代鉑類衍生物,洛鉑以其較輕的毒副作用、與順鉑不完全交叉耐藥以及較強(qiáng)的抗腫瘤效應(yīng),已初步顯示了其在腫瘤治療中的重要作用。本實(shí)驗(yàn)以人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7為模型,采用MTT比色法、流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)洛鉑對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖及凋亡誘導(dǎo)

3、作用,應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)MTDH基因表達(dá),初步探討洛鉑對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞的增殖、凋亡及對(duì)MTDH基因表達(dá)的影響。為洛鉑在乳腺癌化療中的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
  方法:
  1.使用MTT比色法檢測(cè)洛鉑對(duì)細(xì)胞的增殖抑制情況。
  2.應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)洛鉑作用48h后MCF-7細(xì)胞凋亡率的改變。
  3.應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)洛鉑作用48h后MTDH基因表達(dá)的變化。
  結(jié)果:
  1.不同濃度

4、洛鉑(5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L)在同一時(shí)間抑制率與對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。同一濃度洛鉑作用24、48、72小時(shí)抑制率與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。洛鉑能明顯抑制乳腺癌MCF-7細(xì)胞的增殖,抑制率隨著藥物濃度的增加而增加,有劑量依賴關(guān)系;抑制率并隨著藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,有時(shí)間依賴關(guān)系。
  2.不同濃度洛鉑5mg/L、10mg/L、15mg/L作用于MCF-7細(xì)胞

5、48h后凋亡率分別為19.39±0.67%,24.53±1.20%,65.02±0.78%,隨著洛鉑濃度的增高,細(xì)胞凋亡的比例增加,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。洛鉑對(duì)MCF-7細(xì)胞凋亡的影響呈劑量依賴性。洛鉑可通過誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡進(jìn)而影響其增殖。
  3.對(duì)照組及不同濃度洛鉑組(5mg/L、10mg/L、15mg/L)作用乳腺癌MCF-7細(xì)胞48h后,可見GAPDH mRNA在各組中均有表達(dá)。隨著洛鉑作用濃

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