溫化膠囊對人乳腺癌MCF-7和T-47D細胞株細胞增殖和細胞周期的影響.pdf

1、目的：研究溫化膠囊對人乳腺癌MCF-7和T-47D細胞株細胞增殖和細胞周期的影響。 方法：實驗分四個階段進行。第一階段，使用高效液相色譜法對溫化膠囊進行指紋圖譜分析，并以烏頭堿標準品為對照定量分析溫化膠囊所含烏頭堿；第二階段，對MCF-7和T-47D細胞株進行體外細胞培養(yǎng)，設立空白對照組、75μg/ml溫化膠囊組及250μg/ml溫化膠囊組3組，觀察7天，繪制生長曲線，采用重復測量的方差分析法對細胞生長曲線進行線間比較。利用倒置

2、相差顯微鏡觀察兩細胞株加藥前后的形態(tài)學改變。第三階段，使用流式細胞儀分析溫化膠囊對MCF-7和T-47D細胞株細胞周期的影響。第四階段，研究溫化膠囊聯(lián)合5-Fu對MCF-7和T-47D細胞增殖的影響。常規(guī)培養(yǎng)細胞，分6組進行實驗：空白對照組、75μg/ml溫化膠囊組、250μg/ml溫化膠囊組、1μg/ml5-Fu組、75μg/ml溫化膠囊聯(lián)合1μg/ml5-Fu組、250μg/ml溫化膠囊溫化膠囊聯(lián)合1μg/ml5-Fu組，繪制生長曲

3、線，計算細胞倍增時間。通過計算死亡細胞比例比較6組間細胞毒作用的強弱。 結果：繪制出溫化膠囊高效液相色譜指紋圖譜，測得溫化膠囊烏頭堿含量為1.01±0.01μg。溫化膠囊對MCF-7和T-47D細胞具有增殖抑制作用，其作用的強度與藥物劑量呈正相關。細胞形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn)，加入溫化膠囊后兩種細胞株的細胞質內均出現(xiàn)空泡樣結構。隨著藥物作用時間的延長，空泡樣結構的數(shù)量進行性增加，并可融合成大泡。流式細胞儀檢查顯示：與對照組相比，加藥后S期