放射性肝損傷的生化、CT影像學(xué)及病理學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 1、探討肝臟在不同放療劑量下肝功能、凝血功能及肝纖維化指標(biāo)變化情況。 2、觀察兔肝臟放療前、后CT動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描特點(diǎn)；測(cè)量放療前、后肝臟照射區(qū)與未照射區(qū)不同時(shí)相下CT值大小。 3、觀察不同放療劑量下肝臟病理學(xué)改變特點(diǎn)并評(píng)價(jià)肝臟纖維化情況。 方法： 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組--將20只新西蘭白兔隨機(jī)平均分為4組，A組為空白對(duì)照組，B、C、D三組分別為10Gy組、15Gy組和20Gy組。 2、半

2、肝放射治療--①麻醉將速眠新Ⅱ和氯胺酮1:1配比混合后，按0.3 ml/Kg肌肉注射，麻醉B、C、D三組實(shí)驗(yàn)用兔；②體位與固定取仰臥位，然后將兔固定于木制兔臺(tái)上，兔臺(tái)固定于治療床上的負(fù)壓真空墊內(nèi)；③定位行CT定位掃描，掃描范圍從膈頂至肝臟下緣，并將CT定位掃描信息傳輸至TPS工作站中；④計(jì)劃以膽囊為界勾畫右半肝為放療靶區(qū)，55％等劑量曲線為處方曲線；⑤采用全身伽瑪?shù)?.5準(zhǔn)直器放射治療。 3、化驗(yàn)檢查--實(shí)驗(yàn)用兔于放療前、放療后

3、48小時(shí)內(nèi)、放療后1周、2周、1月、2月、3月行肝功能(ALT、AST、ALP、GGT、TP、ALB、TBIL、DBIL、PA)，凝血功能(PT、PT％、PTINR、FbgC、TT)，纖維化組合(LN、PcIII、IV.C)檢查。抽血前禁食8小時(shí)，將兔固定于兔盒內(nèi)，二甲苯涂抹耳緣靜脈處，待血管充盈良好后抽取血液標(biāo)本2ml送檢。 4、CT檢查-B、C、D三組實(shí)驗(yàn)兔于放療前及放療后3個(gè)月行肝臟CT平掃加增強(qiáng)。動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描：造影劑(安

4、射力注射液350與生理鹽水混合配置成300)以0.5ml/s的速率注入5ml，動(dòng)脈期15s，靜脈期41.5s，延遲期103s。獲得兔肝CT平掃及增強(qiáng)掃描三期圖像。 5、病理取材及觀察--實(shí)驗(yàn)用兔處死后，切取3塊1cm3大小的肝臟組織，取材區(qū)分別為：高劑量區(qū)(放療靶區(qū)中心)，低劑量區(qū)(放療靶區(qū)邊緣)，未照射區(qū)(左半肝外側(cè)葉)。標(biāo)本用10％福爾馬林液固定，石蠟包埋，5um連續(xù)切片，行HE和Masson染色后顯微鏡觀察。 6、

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理--應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理本實(shí)驗(yàn)所有資料。B、C兩組放療前后左、右半肝在不同CT掃描時(shí)相下的CT值及動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)的各項(xiàng)化驗(yàn)指標(biāo)均采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)資料的方差分析。記錄不同放射劑量下放射性肝損傷的病理表現(xiàn)特點(diǎn)，建立表格對(duì)照。 結(jié)果： 1、實(shí)驗(yàn)用兔存活率 A、B、C三組無實(shí)驗(yàn)用兔死亡，存活率100％，D組死亡3只，存活率40％，D組資料不參與統(tǒng)計(jì)分析。D組(20Gy)3只死亡實(shí)驗(yàn)用兔于放療后出現(xiàn)腹瀉、食欲差、

6、精神差、乏力表現(xiàn)，在放療后5-10天內(nèi)死亡。 2、化驗(yàn)檢查結(jié)果①肝功能改變放療后3月內(nèi)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)B、C兩組實(shí)驗(yàn)用兔的AST、TBIL、DBIL、TP、ALB五項(xiàng)指標(biāo)于放療后1月起上升顯著(PAST<0.05，PTBIL<0.05，PDBIL<0.05，PTP<0.05，PALB<0.05)；GGT指標(biāo)呈波動(dòng)性變化，于放療后1天下降，至放療后2月回升(PGGT<0.05)；ALP指標(biāo)于放療后1天內(nèi)下降明顯，此后至放療后3月逐漸降至為

7、放療前的一半左右(PALP<0.05)；ALT、PA指標(biāo)則無明顯改變(PAIT>0.05，PPA>0.05)。②凝血功能B、C兩組PT、PTINR指標(biāo)隨時(shí)間遷移無改變(PPT>0.05、PPTINR>0.05)；而PT％、FbgC、TT指標(biāo)隨時(shí)間遷移發(fā)生改變(PPT％<0.05、PFbgC<0.05、PTT<0.05)，其中FbgC、TT指標(biāo)均于放療后1天開始升高，1周后升至最高，2周后恢復(fù)至正常，PT％則在150-200范圍內(nèi)呈波動(dòng)性

8、變化。③纖維化指標(biāo)纖維化指標(biāo)未見明顯改變(PLN>0.05，PPcIII>0.05，PIV.C>0.05)。 3、CT影像結(jié)果①CT影像學(xué)表現(xiàn)實(shí)驗(yàn)用兔放療前肝臟CT影像表現(xiàn)為平掃時(shí)顯示肝臟密度均勻，動(dòng)脈期肝臟輕度增強(qiáng)，靜脈期強(qiáng)化明顯，肝內(nèi)靜脈顯影清楚，延遲期造影劑減退，仍可見肝內(nèi)靜脈顯影；B、C、D三組(共12只)放療后3個(gè)月肝臟CT影像表現(xiàn)為平掃時(shí)肝臟大小、形態(tài)正常，密度均勻，增強(qiáng)掃描時(shí)動(dòng)脈期無強(qiáng)化，靜脈期廣泛輕度強(qiáng)化，肝內(nèi)靜脈顯示不

9、清，延遲期強(qiáng)化不明顯。平掃及增強(qiáng)掃描三期均未觀察到與放療計(jì)劃中某條等劑量曲線范圍一致的肝臟密度改變4、病理結(jié)果①肉眼觀，A組肝臟呈紅褐色，表面光滑，質(zhì)地柔軟而脆；B、C、D三組肝臟表面及切面呈灰黃色，膈面近中心處為著，肝臟邊緣呈灰紅色，照射劑量越高，上述改變?cè)矫黠@。肝臟各葉間肉眼觀無顯著差別；②光鏡下，B、C、D三組放療后3個(gè)月肝臟病理見中央靜脈及血竇淤血，可見肝靜脈閉塞征(venous occlusive disease，VOD)，膽

10、管周圍炎細(xì)胞浸潤(rùn)，匯管區(qū)膠原纖維增多，竇周出現(xiàn)膠原纖維沉積，上述改變隨放療劑量增大而加重。同一肝臟放療后其放射性肝損傷的病理變化隨著未照射區(qū)、低劑量區(qū)、高劑量區(qū)的變化而呈加重趨勢(shì)，但變化趨勢(shì)不如劑量組不同而改變明顯；③D組(20Gy)3只死亡實(shí)驗(yàn)用兔切取腸標(biāo)本，肉眼觀可見粘膜明顯水腫，多發(fā)出血點(diǎn)、淤血灶，未見潰瘍及穿孔。HE染色，光鏡下觀察可見粘膜及粘膜下可見大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，呈急性炎癥性表現(xiàn)。 結(jié)論： 1、伽瑪?shù)斗暖熗冒?/p>

11、肝劑量達(dá)20cGy時(shí)，死亡率明顯增高，達(dá)60％，死亡原因與放射性腸炎及肝臟放射性損傷相關(guān)。 2、肝臟放療可以引起肝臟功能的改變。主要表現(xiàn)放療后1月起轉(zhuǎn)氨酶及膽紅素指標(biāo)出現(xiàn)升高改變；堿性磷酸酶在放療后3月內(nèi)則呈降低改變。 3、肝臟放療可以引起凝血功能改變，F(xiàn)bgC、TT指標(biāo)于放療后1周升至最高，2周后恢復(fù)至正常：FbgC、TT對(duì)肝臟急性放射性炎癥診斷靈敏性較高。 4、血清肝纖維化組合化驗(yàn)檢查放療前后未見明顯改變，而