瞼板腺功能障礙患者瞼板腺形態(tài)研究及瞼脂成分的GC-MS分析.pdf

1、第一部分瞼板腺功能障礙瞼板腺缺失與功能的關(guān)系研究
　　目的觀察了解正常志愿者及眼科門診患者瞼板腺形態(tài)和功能,探討瞼板腺功能障礙(Meibomian Gland Dysfunction，MGD)患者瞼板腺缺失與眼表功能改變的關(guān)系,同時(shí)觀察長(zhǎng)期使用眼藥水患者瞼板腺形態(tài)及功能特點(diǎn)。
　　方法：選擇2013年10月至2014年10在福建醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院眼科門診患者131例及健康志愿者50例作為研究對(duì)象。每一位被檢者均進(jìn)行下述檢查

2、并收集數(shù)據(jù)：詢問(wèn)基本信息及眼表疾病指數(shù)量表(Ocular SurfaceDisease Index，OSDI)調(diào)查，裂隙燈瞼緣檢查評(píng)估，瞼脂性狀評(píng)分，淚膜破裂時(shí)間(Tear Break-up Time，TBUT)測(cè)定,角膜熒光素染色(Fluorescein Staintest，F(xiàn)L)，淚液分泌功能測(cè)定(Schirmer I Test，SIT)，使用非接觸性紅外線瞼板腺觀察儀(Noncontact Infrared Meibography

3、，NIM)對(duì)每位被檢者瞼板腺形態(tài)進(jìn)行觀察記錄并評(píng)分，了解瞼板腺缺失（Meibomian Gland Loss，MGL）的情況。對(duì)確診的各類型病例進(jìn)行對(duì)比分析，并對(duì)MGD患者瞼板腺缺失與其他檢測(cè)指標(biāo)的Spearman相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：50例正常志愿者中,MGL評(píng)分為0分者23例,1分者22例,2分者5例，構(gòu)占比分別為46％、44%和10%，TBUT≤5s者占18%，F(xiàn)L陽(yáng)性占12%，OSDI評(píng)分中值為8(IQR:5-11.75

4、)，女性O(shè)SDI評(píng)分（中值：11，IQR:5.75-13）明顯高于男性（中值:6，IQR:5-8.75）,P=0.017。眼科門診131例病例中MGL評(píng)分為0分、1分、2分、3分、4分、5分、6分者構(gòu)占比分別為14.50%、24.43%、16.03%、14.50%、14.50%、9.16%和6.87%；診斷為MGD共88例，占67.2%，其中單純MGD者49例，混合MGD（單純MGD合并ATD）者39例，MGL評(píng)分為1分、2分、3分、4

5、分、5分和6分者構(gòu)占比分別9.09%、23.86%、21.59%、21.59%、13.64%和10.23%，MGL評(píng)分大多分布在2-4分；下眼瞼較上眼瞼腺體縮短增粗明顯，下瞼MGL（1.96±0.727）明顯高于上瞼（1.58±0.672），P=0.008；與混合MGD相比，單純MGD的SIT和TBUT均有明顯增高（P＜0.001）,然而,FL有明顯的降低（P＜0.001），OSDI和MGL則無(wú)明顯差別（P=0.071）；MGD的MGL

6、與SIT、FL、OSDI、瞼脂均呈顯著性正相關(guān)（R值分別為0.660、0.536、0.620、0.562，P＜0.001），與TBUT呈顯著性負(fù)相關(guān)（R值-0.589，P＜0.001）。使用眼藥水小于2年的OSDI、FL、MGL、瞼緣、瞼脂評(píng)分均明顯高于正常組（t分別為17.014、7.813、6.447、7.213和4.543，p＜0.001），TBUT評(píng)分則明顯低于正常組（t=-3.877，p＜0.001）；用藥史＞2年者M(jìn)GL、F

7、L、瞼緣和瞼脂評(píng)分明顯高于用藥史＜2年（t分別為5.159、2.604、2.883和3.597，p＜0.01），TBUT評(píng)分則明顯降低（t=-4.918，p＜0.001），SIT和OSDI兩組則無(wú)顯著性差異（p分別為0.533和0.442）。
　　結(jié)論：正常人群中存在一部分臨床前期MGD,表現(xiàn)為低評(píng)分瞼板腺形態(tài)及眼表性狀改變；眼科門診發(fā)生率較高的MGD患者中相當(dāng)部分合并水液缺乏性干眼（Aqueous Tear Deficiedcy

8、 ATD），MGL大多以中等評(píng)分為主，且MGL與SIT具有顯著的正相關(guān)性，可能由于MGD瞼板腺體缺失代償性的增加淚液分泌量；長(zhǎng)期使用眼藥水可改變瞼板腺形態(tài)和并影響眼表生理功能。
　　第二部分瞼板腺功能障礙患者瞼脂主要成分的GC-MS分析
　　目的采用氣相色譜聯(lián)合質(zhì)譜法（Gas Chromatography-Mass Spectrometer GC-MS）分析比較健康者和瞼板腺功能障礙（MGD）患者的主要瞼脂成分。
　　

9、方法:正常組20例，瞼板腺功能障礙組19例，均采用改良的瞼板腺壓榨方法收集瞼脂，采用GC-MS法分析瞼脂成分與結(jié)構(gòu)，得到樣本總離子圖,通過(guò)GC-MS solution化學(xué)工作站檢索NIST08標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)并結(jié)合人工譜圖解析，通過(guò)對(duì)基峰、質(zhì)荷比和相對(duì)豐度等方面進(jìn)行比較，分析鑒定瞼脂的主要化學(xué)成分；按峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算，求得各主要化學(xué)組分的峰面積相對(duì)百分比含量。
　　結(jié)果:通過(guò)GC-MS系統(tǒng)，共分離出102種瞼脂成分，明確鑒定23

10、種化合物，包括3種烷烴、4種烯、2種醇、1種芳烴、7種酯、4種脂肪酸、1種酰胺、1種酚，尚有79個(gè)色譜峰因?yàn)橘|(zhì)譜圖庫(kù)中無(wú)相應(yīng)物質(zhì)信息，未進(jìn)行對(duì)比鑒定。瞼脂成分的個(gè)體差異性較大。其中棕櫚油酸、軟脂酸、硬脂酸、角鯊烯水平在MGD患者組明顯低于正常組（t棕櫚油酸=0.977，t軟脂酸=2.105，t硬脂酸=1.820，t角鯊烯=2.804，p＜0.05）。
　　結(jié)論:瞼脂中棕櫚油酸、軟脂酸、硬脂酸、角鯊烯在MGD患者中明顯降低，提示MG