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1、目的:以常規(guī)胸液細胞學(xué)檢查作對照,探討用原位雜交(ISH)細胞化學(xué)技術(shù)檢測胸液細胞中人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)mRNA對良、惡性胸腔積液的鑒別診斷價值.方法:首先摸索、建立"地高辛標(biāo)記的寡核苷酸探針兩步原位雜交檢測胸液細胞hTERT mRNA"的實驗方法,其主要操作步驟為:制備細胞涂片,預(yù)處理后,以地高辛標(biāo)記的寡核苷酸探針對胸液細胞hTERT mRNA行兩步原位雜交,再通過后續(xù)的抗原-抗體-酶-顯色途徑,將hTERT mRNA信號測
2、出.所有操作均在低溫狀態(tài)下,設(shè)陰性和陽性對照.在實驗方法建立后,隨機對103例胸腔積液初治病例行ISH法檢測胸液細胞hTERT mRNA的前瞻性研究.實驗研究嚴(yán)格遵照盲法原則,與臨床診療各自獨立進行,相互不交換信息.所有納入病例均在留取實驗用胸液標(biāo)本時,同步送胸液細胞學(xué)檢查,對首次胸液細胞學(xué)檢查陰性但臨床上不能排除惡性胸腔積液的病例,臨床采取反復(fù)多次送檢(至少3次,以下簡稱反復(fù)胸液細胞學(xué)檢查)及其它檢查,以期明確病因.在所有實驗完成后,
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