中藥荷丹片的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)與質(zhì)量控制研究.pdf

1、高脂血癥是現(xiàn)代富貴文明病之一。隨著生活的質(zhì)量提高，高蛋白、高脂飲食機(jī)會增多，加上運(yùn)動量減少，血中的脂肪由于沒法燃燒消耗而積聚從而導(dǎo)致高脂血癥。在中國，高脂血癥人群隨經(jīng)濟(jì)的發(fā)展而增加，其年輕化的趨勢令人擔(dān)心。醫(yī)學(xué)界已經(jīng)證明--高脂血癥者患心臟病的機(jī)會是正常人的四倍。據(jù)統(tǒng)計，現(xiàn)在我國至少有9000萬人患有高脂血癥。大量研究資料表明，高脂血癥是腦卒中、冠心病、心肌梗死、心臟猝死獨(dú)立而重要的危險因素。此外，高脂血癥也是促進(jìn)高血壓、糖耐量異常、糖

2、尿病的一個重要危險因素。高脂血癥還可導(dǎo)致脂肪肝等其他嚴(yán)重疾病。
　　 中藥在治療高脂血癥方面相比較于西藥有著獨(dú)特的優(yōu)勢，其療效肯定，持續(xù)，副作用小。特別是在辨證分型方面，體現(xiàn)了中醫(yī)靈活組方，因人制宜的治療特色。中醫(yī)學(xué)上無高脂血癥病名，臨床辨證多歸于肝腎虧虛，脾虛痰濁，氣滯血瘀。治療時大多用補(bǔ)益肝腎，健脾益氣，滋陰養(yǎng)血，活血化瘀，清熱通便，消食化痰這些藥。
　　 荷丹片為國著名老中醫(yī)楊濟(jì)生獻(xiàn)方研制，具有明確降血脂療效的中藥

3、復(fù)方。本方由荷葉、丹參、山楂、番瀉葉、補(bǔ)骨脂（鹽炒）五味中藥組方制備而成，具有化痰降濁、活血化瘀的功效。適片于高脂血癥屬痰濁夾瘀者。本方荷葉為君藥，行氣祛濕；丹參為臣藥，活血化瘀；補(bǔ)骨脂為臣藥，溫補(bǔ)肝腎；山楂為佐藥，消食化積；番瀉葉為使藥，瀉熱行滯，通便利水。具有化痰降濁，活血化瘀，補(bǔ)益肝腎，健脾消食，以消除痰瘀，調(diào)整臟腑功能，起驅(qū)邪扶正之作用。臨床效果明顯。
　　 近年來，對于荷丹片的研究較少，少數(shù)報道集中在其降血脂效果及臨床

4、觀察方面，對于該復(fù)方所含成分及降血脂有效成分的研究鮮有報道，作為一種科學(xué)客觀的分析與質(zhì)量控制技術(shù)，明確荷丹片中所含成分，研究這些成分在體內(nèi)的代謝變化與降血脂作用的相關(guān)性，對于尋找該復(fù)方藥效成分并對其進(jìn)行質(zhì)量控制有著極其重要的意義。
　　 然而中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究不僅要求對其中指標(biāo)性成分進(jìn)行精確的含量測定，還需對其中所含各類化學(xué)成分進(jìn)行鑒別，從而達(dá)到整體全面地控制與評價中藥質(zhì)量。中藥藥效成分的研究不儀要求對其本身所含化學(xué)成分進(jìn)行

5、區(qū)分鑒別，還需對其入血成分進(jìn)行分析測定，確定可能的約效成分，同時進(jìn)一步對其體內(nèi)代謝過程和作用機(jī)理進(jìn)行研究，最終確定中藥的有效成分。
　　 中藥成分分析研究的復(fù)雜性與整體性，決定了單靠一種類型的分析技術(shù)并不能滿足中藥分析的要求，所以必須考慮采用多種聯(lián)用分析技術(shù)進(jìn)行綜合分析，發(fā)揮各種聯(lián)用技術(shù)的優(yōu)勢。本論文基于現(xiàn)代聯(lián)用分析技術(shù)，以荷丹片為研究對象，從體內(nèi)外成分分析入手，建立了一套用于中藥體內(nèi)外成分鑒別與藥效成分初步篩選的方法與模式，并

6、將這些方法及相關(guān)技術(shù)應(yīng)用于荷丹片全面質(zhì)量控制中。針對荷丹片中成分分析的要求，建立了HPLC-TOF/MS用于中藥復(fù)雜成分快速分析鑒別的方法與研究模式。借助HPLC-TOF/MS對荷丹片中41個化學(xué)成分進(jìn)行了初步定性。其中來自荷葉中的成分有17個，丹參中的成分有10個，補(bǔ)骨脂中的成分有8個，山楂中的成分有5個，希瀉葉中的成分有1個。與傳統(tǒng)中醫(yī)藥的君臣佐使理論相符。
　　 由于荷丹片為五味中藥組成的復(fù)方，方中化學(xué)成分眾多，且含有大量

7、同分異構(gòu)體，為了對這些同分異構(gòu)體也能進(jìn)行很好的拆分。通過調(diào)整TOF/MS質(zhì)譜儀的碎片電壓，將同分異構(gòu)體成分在不同電壓下打碎，根據(jù)同分異構(gòu)體在不同電壓下的不同碎片離子，對化學(xué)成分進(jìn)行推測，實現(xiàn)了在TOF/MS質(zhì)譜儀上，不但能夠利用精確分子量確定化合物的分子式，而且通過碎片離子將同一分子式的不同同分異構(gòu)體進(jìn)行了有一定根據(jù)的鑒別和分析。
　　 在對荷丹片中的成分研究中發(fā)現(xiàn)，荷葉中的主要成分為生物堿類，丹參中的主要成分為丹參醌類，而補(bǔ)骨

8、脂中的主要成分為香豆素類成分。根據(jù)某一類成分的裂解規(guī)律的總結(jié)和已有文獻(xiàn)的查閱，確定生物堿類成分的裂解方式主要以RDA裂解為主，而丹參醌類化合物的裂解方式主要以功能基的裂解為主。
　　 在對中藥材化學(xué)成分分析鑒別的基礎(chǔ)上，通過給SD大鼠灌胃給藥荷丹片，借助HPLC-TOF/MS，對比體外荷丹片藥材化學(xué)成分峰，對大鼠血漿中成分進(jìn)行分析鑒別，共鑒別出大鼠血漿中11個以原型入血的成分。
　　 在系統(tǒng)考察了色譜條件和樣品前處理方法