中藥注射劑的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)與全程質(zhì)量控制研究.pdf

1、本論文以注射用雙參為研究對象，針對當(dāng)前注射劑質(zhì)量控制方面存在的問題，從化學(xué)成分入手，以注射用雙參中兩味藥材所含生物活性成分為分析對象，通過對其前處理條件的系統(tǒng)研究，確定了丹參與人參兩味藥材、中間體和注射劑中多種化學(xué)成分的最佳提取方法。利用高效液相色譜法對兩味藥材中化學(xué)成分進(jìn)行了快速分離和分析，通過對色譜條件的優(yōu)化，確定了最佳的液相分離分析條件。結(jié)合高分辨飛行時間質(zhì)譜對兩味藥材中所含的主要化學(xué)成分進(jìn)行了定性分析，利用離子阱質(zhì)譜初步解釋了各

2、類主要成分的質(zhì)譜碎裂規(guī)律。在對兩味藥材中化學(xué)成分進(jìn)行定性鑒別與結(jié)構(gòu)解析的基礎(chǔ)上，確定各色譜峰所代表的化學(xué)物質(zhì)，制作中藥材、中間體與注射劑的指紋圖譜，從而達(dá)到對中藥注射劑的有效控制。本文主要分以下兩大部分： 第一部分注射用雙參及相關(guān)藥材中化學(xué)成分的定性鑒別與分析 實驗中分別對丹參與人參藥材的提取條件進(jìn)行了系統(tǒng)優(yōu)化，對于丹參以已有的七個對照品為指標(biāo)，考察了影響丹參藥材提取效率的各個因素，包括提取方法，提取時間，提取溶劑，提取

3、次數(shù)等，最終確定采用70％的甲醇提取。人參通過比較各提取方法，最終采用藥典方法提取人參中人參皂苷類成分。然后對其液相條件進(jìn)行系統(tǒng)考察優(yōu)化以確定最佳的分析檢測條件，使各色譜峰都達(dá)到較好的分離。HPLC-DAD色譜圖顯示丹參藥材色譜圖中，共有40個明顯的色譜峰被分離，人參藥材色譜中有42個明顯的色譜峰被檢測到；借助高分辨飛行時間質(zhì)譜儀對各化學(xué)物質(zhì)質(zhì)核比的精確分辨能力，得到丹參中40個成分和人參中42個成分的精確分子量，對其化學(xué)成分進(jìn)行了初步

4、定性。然后利用離子阱技術(shù)對各同分異構(gòu)體進(jìn)行多級裂解分析，確定各化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)式。結(jié)果顯示丹參的主要特征性成分為酚酸類和二萜醌類成分。其中酚酸類成分極性較大，在色譜圖上首先出峰，集中在0～15min，而二萜醌類成分極性較小，在色譜圖上后出峰，保留時間集中在15～30min。人參的主要特征性成分為人參皂苷。丹參的兩類成分在離子阱上分別顯示出不同的裂解規(guī)律。丹參中酚酸類成分呈現(xiàn)單體、二聚體或多聚體等，大多數(shù)酚酸類成分為丹參素，咖啡酸單體的聚合

5、物，所以其裂解時呈現(xiàn)明顯的脫丹參素、咖啡酸的特點。人參中主要特征性成分為人參皂苷類，據(jù)文獻(xiàn)報道人參皂苷主要分為以下幾種：原人參二醇型，原人參三醇型和齊墩果烷型。三種人參皂苷在離子阱上顯示出各自明顯的裂解規(guī)律。通過對兩味藥材的系統(tǒng)研究，借助三種分離分析技術(shù)，最終在30分鐘內(nèi)定性鑒別出丹參中40種成分，其中包括22種酚酸類成分和18種二萜醌類成分；檢測出人參藥材中42種人參皂苷類成分，其中可定性鑒別的人參皂苷類化學(xué)成分有39種。在對兩味藥材

6、中各化學(xué)成分的系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上，分別對其藥材、中間體和制劑進(jìn)行化學(xué)成分歸類定性，并結(jié)合其臨床應(yīng)用和藥理學(xué)研究結(jié)果，確定其各個色譜峰所代表的化學(xué)物質(zhì)，為指紋圖譜的制作提供可靠依據(jù)。為采用質(zhì)譜法對中藥材、中間體及注射劑中各化學(xué)成分進(jìn)行定性鑒別和質(zhì)量控制的實際應(yīng)用提供了有價值的參考。 第二部分注射用雙參藥材、中間體、制劑的指紋圖譜研究 在對藥材、中間體、制劑分別進(jìn)行了定性鑒別和結(jié)構(gòu)確證的基礎(chǔ)上，對色譜圖中各共有峰進(jìn)行成分明確化

7、分析。在對中藥材、中間體和注射劑中各化學(xué)成分進(jìn)行定性鑒別和系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上，利用HPLC-DAD，HPLC-TOF-MS，HPLC-MS<'n>三種分離分析技術(shù)，以HPLC-DAD為主，HPLC-TOF-MS，HPLC-MS<'n>為輔，HPLC-TOF-MS，HPLC-MS<'n>二種技術(shù)用于各成分的定性鑒別，確定其共有峰所代表的化學(xué)物質(zhì)，以HPLC-DAD為主，制作指紋圖譜。利用HPLC分別建立了丹參與人參藥材不同批次的指紋圖譜，中