2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、沉香化氣丸收載于《中國藥典》(2015年版)中,全方由沉香、木香、廣藿香、醋香附、陳皮、砂仁、醋莪術(shù)、六神曲(炒)、炒麥芽、甘草十味藥構(gòu)成。有理氣疏肝,消積和胃之功效,常用于治療胃潰瘍、消化性不良、脘腹脹痛等疾病。目前,對于沉香化氣丸復(fù)方的研究僅局限于基本的藥材鑒別、藥效研究和少量成分的含量測定,難以說明沉香化氣丸的整體藥效和“多成分、多靶點(diǎn)、多途徑”整合治療作用的特點(diǎn),無法科學(xué)反映其內(nèi)在質(zhì)量。
  因此本課題將利用UPLC-Q-

2、TOF/MS技術(shù)對沉香化氣丸的化學(xué)成分進(jìn)行定性分析及口服給藥后藥物在體內(nèi)代謝的研究,著眼于分析沉香化氣丸體內(nèi)和體外化學(xué)成分的變化,為進(jìn)一步闡明沉香化氣丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)具有重要意義。同時(shí)建立中藥指紋圖譜技術(shù)與多種指標(biāo)成分含量測定的分析方法,對中藥復(fù)方的整體性質(zhì)量進(jìn)行控制,為沉香化氣丸的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。本論文的實(shí)驗(yàn)研究從以下四個(gè)方面進(jìn)行:
  一、基于UPLC-Q-TOF/MS快速鑒別沉香化氣丸中化學(xué)成分的研究
  采用U

3、PLC-Q-TOF/MS技術(shù)對中藥復(fù)方沉香化氣丸中的化學(xué)成分進(jìn)行定性分析。實(shí)驗(yàn)采用Phenomenex Kinetex C18色譜柱(4.6mm×100mm,2.7μm),流動(dòng)相為乙睛-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脫,體積流量為0.8mL·min-1;采用電噴霧源(ESI)正、負(fù)離子模式下分別采集數(shù)據(jù)。根據(jù)化合物準(zhǔn)確的相對分子質(zhì)量、二級碎片離子信息、相關(guān)參考文獻(xiàn)數(shù)據(jù)及對照品對照,從沉香化氣丸中分離和鑒定出73個(gè)化學(xué)成分,包括36個(gè)黃酮類、

4、16個(gè)2-(2-苯乙基)色酮類、7個(gè)三萜皂苷類、2個(gè)倍半萜內(nèi)酯及12個(gè)其他類成分。本實(shí)驗(yàn)表明UPLC-Q-TOF/MS聯(lián)用技術(shù)為鑒別沉香化氣丸中化學(xué)成分提供簡便、快速、準(zhǔn)確的方法,該研究為進(jìn)一步分析沉香化氣丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量控制提供了研究基礎(chǔ)。
  二、沉香化氣丸UPLC指紋圖譜與化學(xué)模式識別研究
  建立沉香化氣丸的超高效液相色譜(UPLC)指紋圖譜,為評價(jià)該制劑的整體質(zhì)量提供參考依據(jù)。采用Phenomenex Kin

5、etex C18(4.6mm×100mm,2.7μm)色譜柱,流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脫,體積流量為0.8mL·min-1;柱溫35℃;分段變波長測定:0~3min,285nm;3~20min,210nm;20~24min,254nm;24~42min,210 nm。采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)(2012版)”對20批沉香化氣丸樣品計(jì)算相似度。建立了20批沉香化氣丸指紋圖譜,標(biāo)定了27個(gè)共有峰,通過對照品指認(rèn)了1

6、2個(gè)共有峰,20批樣品相似度均大于0.98,共有峰保留時(shí)間的RSD<0.5%,峰面積的RSD比較大,表明各批次的樣品化學(xué)成分較為相似,但其成分的含量存在一定差異。通過聚類分析可將樣品聚為3類,并結(jié)合主成分分析、正交偏最小二乘法判別分析法,發(fā)現(xiàn)蕓香柚皮苷、橙皮苷、甘草苷、木香烴內(nèi)酯等7個(gè)成分是造成不同批次樣品差異性的主要標(biāo)記物。指紋圖譜的構(gòu)建與化學(xué)模式識別為沉香化氣丸的質(zhì)量控制提供更全面的參考。
  三、UPLC波長切換法同時(shí)測定沉

7、香化氣丸中7種成分的含量
  建立UPLC波長切換法同時(shí)測定沉香化氣丸中甘草苷、蕓香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、甘草酸、木香烴內(nèi)酯和廣藿香酮的含量測定方法。采用Phenomenex Kinetex C18色譜柱(4.6mm×100mm,2.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液為流動(dòng)相,梯度洗脫,流速0.8mL·min-1,波長切換(0~20min,210nm,檢測甘草苷、蕓香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷;20~25min,254nm,檢測甘

8、草酸;25~30.8min,210nm,檢測木香烴內(nèi)酯;30.8~34min,310nm,檢測廣藿香酮),柱溫35℃。7種有效成分與相鄰峰達(dá)到基線分離,7種成分的峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系(r=0.9994~1.0000);平均加樣回收率(n=6)范圍為98.7%~101.7%,RSD均小于2.88%;方法重復(fù)性(n=6)的RSD均小于2.93%;供試品溶液在室溫條件下24h內(nèi)穩(wěn)定,RSD均小于1.81%。該方法快速、準(zhǔn)確度高、靈敏度

9、高,專屬性強(qiáng),為沉香化氣丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供參考。
  四、沉香化氣丸在大鼠體內(nèi)的入血成分及代謝產(chǎn)物研究
  采用UPLC-Q-TOF/MS技術(shù)檢測沉香化氣丸后大鼠血漿及尿樣中的入血成分及代謝產(chǎn)物。實(shí)驗(yàn)采用Phenomenex Kinetex C18色譜柱,流動(dòng)相為乙睛-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脫,體積流量為0.8mL·min-1;采用電噴霧源(ESI)下采集數(shù)據(jù)。對空白大鼠與給藥大鼠血漿和尿樣的總離子流圖,進(jìn)行提取目標(biāo)離

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