腦得生丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、本文分析了近年來中藥復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究現(xiàn)狀和研究方法，探討了中藥復(fù)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究對(duì)中藥創(chuàng)新發(fā)展的意義，歸納了研究對(duì)象腦得生丸中主要化學(xué)成分及其藥理活性的研究概況。在中醫(yī)藥學(xué)理論和實(shí)踐的指導(dǎo)下，設(shè)計(jì)研究路線，以追蹤中藥復(fù)方整體藥效部位為核心，結(jié)合藥效學(xué)試驗(yàn)篩選出腦得生丸的有效部位，借助大孔吸附樹脂純化技術(shù)對(duì)腦得生丸進(jìn)行純化分離得到腦得生洗脫部位，并采用適宜的分析手段建立藥效部位的質(zhì)量控制方法。 研究以總皂苷、總黃酮、葛根

2、素和羥基紅花黃色素A（HSYA）等有效成分為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)和大孔吸附樹脂純純化技術(shù)優(yōu)選提取純化工藝為：將腦得生丸成方分為兩部分，以三七、川芎和山楂為第一部分，粗粉混勻，用10倍量80％乙醇的溶劑回流提取2次，每次60min，合并提取液，減壓回收溶劑，浸膏減壓干燥，得腦得生丸第一部分提取樣品Ⅰ；以葛根和紅花為第二分，用12倍量40％乙醇的溶劑回流提取2次，每次45min，，合并提取液，減壓回收溶劑，浸膏減壓干燥，得腦得生丸第二

3、部分提取樣品Ⅱ。腦得生的兩部分提取物（樣品Ⅰ、Ⅱ）均以A型吸附樹脂為純化填料，樹脂柱徑高比為H1，上樣濃度分別為C1和Ca，上樣量與樹脂體積比均為N，以5B倍樹脂體積的水清洗樹脂柱后，分別用M％乙醇（樣品Ⅰ）和N％乙醇（樣品Ⅱ）洗脫樹脂，洗脫劑用量分別為5B和6B量樹脂體積。收集M％和N％乙醇洗脫液，合并，減壓干燥至干，粉碎，混勻，制得腦得生純化樣品。建立大鼠全腦缺血為模型，以神經(jīng)癥狀評(píng)分，腦組織含水量，腦梗死面積為評(píng)價(jià)指標(biāo)初步篩選出腦

4、得生丸的藥效部位，并通過藥效學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)證所得純化樣品為腦得生丸的藥效部位。 利用HPLC法和UV法，建立了腦得生丸藥效部位的質(zhì)量控制方法。藥效部位中的總皂苷含量為12.52％～12.71％，總黃酮含量為11.53％～11.75％，阿魏酸含量為0.226％～0.229％，異黃酮的含量總和為35.43％～36.07％，HSYA含量為2.14％～2.21％，腦得生有效部位中可測(cè)定的成分總含量大于60％。其中總皂苷、總黃酮、阿魏酸、異黃酮

5、（葛根素、3‘－甲氧基葛根素、芹糖基葛根素和大豆苷之和）和HYSA的轉(zhuǎn)移率分別為89.14％～90.81％，79.33％～81.13％，81.89％～84.25％，84.47％～85.72％，71.21％～73.38％，表明研究所建立的腦得生丸藥效部位提取純化工藝是合理的、可行的，各有效成分的含量和轉(zhuǎn)移率均符合開發(fā)新藥要求。 本研究初步闡釋了三七總皂苷、山楂總黃酮、阿魏酸、異黃酮（葛根素、3‘－甲氧基葛根素、芹糖基葛根素和大豆苷