烏檀和澤瀉的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、中藥所含的各類(lèi)型化學(xué)成分是中藥藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，明確中藥的化學(xué)成分對(duì)于中藥的藥效物質(zhì)研究起著關(guān)鍵作用。藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究有利于發(fā)現(xiàn)中藥中具有藥理作用的成分群，明確中藥的有效成分，從而能保證中藥臨床應(yīng)用的有效，推動(dòng)中藥的現(xiàn)代化進(jìn)程。
　　本文從中藥化學(xué)成分的提取分離，結(jié)構(gòu)分析，體外活性篩選，到體內(nèi)代謝展開(kāi)了中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究。論文選取了烏檀和澤瀉為研究對(duì)象，采用經(jīng)典的提取分離方法和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，分離分析了烏檀所含的生物堿類(lèi)化學(xué)成分和

2、澤瀉所含的萜類(lèi)化學(xué)成分;對(duì)烏檀中生物堿的質(zhì)譜裂解行為進(jìn)行了研究;對(duì)烏檀和澤瀉的藥理活性進(jìn)行了篩選，初步探索了澤瀉提取物在大鼠體內(nèi)的代謝和組織分布情況。主要的研究?jī)?nèi)容和成果如下:
　　1、采用多種色譜分離技術(shù)，綜合運(yùn)用ESI-MS、NMR等波譜學(xué)方法，從烏檀70％乙醇的提取物中分離、鑒定了6個(gè)化合物。這6個(gè)化合物均為β-卡波林堿類(lèi)吲哚類(lèi)生物堿，其中19-O-methylangustoline，angustine，3，14-dihyd

3、roangustine為首次從烏檀中分離得到，19-O-methylangustoline為首次從茜草科中分離得到，化合物angustoline，angustine和3，14-dihydroangustoline具有弱的抗氧化活性。
　　2、采用了ESI-MSn，HPLC-ESI-MSn和HPLC-TOF/MS定性分析方法分析了烏檀提取物中的吲哚類(lèi)生物堿。對(duì)分離得到的6個(gè)對(duì)照品進(jìn)行ESI-MS直接進(jìn)樣分析，首次推導(dǎo)了該種類(lèi)型吲哚類(lèi)

4、生物堿的質(zhì)譜裂解規(guī)律，發(fā)現(xiàn)此類(lèi)型的吲哚生物堿結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性受D-環(huán)飽和度的影響。根據(jù)此規(guī)律并結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道，共鑒定或推測(cè)了烏檀提取物中的10個(gè)吲哚和1個(gè)吲哚里西啶環(huán)類(lèi)生物堿成分。
　　3、采用多種色譜分離技術(shù)，綜合運(yùn)用ESI-MS、NMR等波譜學(xué)方法，從澤瀉70％乙醇的提取浸膏的乙酸乙酯萃取部分分離，鑒定了11個(gè)化合物，其中1個(gè)為首次發(fā)現(xiàn)的新化合物，命名為11，24-dihydroxy-alsol H。這11個(gè)化合物，1個(gè)為倍半萜類(lèi)，

5、其它10個(gè)均為原萜烷型成分。采用了ESI-MSn技術(shù)總結(jié)歸納了原萜烷型三萜類(lèi)成分的質(zhì)譜裂解規(guī)律。
　　4、分別采用細(xì)胞模型和酶模型從不同的機(jī)制對(duì)澤瀉醇提物的降糖藥理活性進(jìn)行了研究。細(xì)胞系模型采用了3T3-L1前脂肪細(xì)胞系模型，研究了澤瀉醇提物的降糖和降脂活性。研究表明在3T3-L1誘導(dǎo)試驗(yàn)中，澤瀉醇提物及其3個(gè)化合物能夠增加培養(yǎng)液中葡萄糖的消耗，證明澤瀉醇提物能夠提高3T3-L1細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取。同時(shí)通過(guò)對(duì)紅油O染色結(jié)果的測(cè)定表

6、明，澤瀉醇提物及其3個(gè)化合物在增加3T3-L1細(xì)胞對(duì)葡萄糖消耗的同時(shí)不增加脂肪的生成，從而避免了羅格列酮類(lèi)藥物的副作用。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)化合物alisol A-24-aceate能與3T3-L1脂肪細(xì)胞結(jié)合，推測(cè)為可能的潛在的活性成分。酶模型采用了α-糖苷酶模型，以阿卡波糖為對(duì)照組，研究表明澤瀉醇提物及其3個(gè)化合物能對(duì)α-糖苷酶有一定的抑制效果，從而產(chǎn)生降糖作用。
　　5、采用HPLC-tQMS分析技術(shù)，建立了大鼠血漿及組織中alisol