基于液質聯(lián)用技術的溫絡方藥效物質基礎研究.pdf

1、中藥復方是中醫(yī)辨證論治、整體觀思維的具體表現(xiàn),它是一組具有化學成分非常復雜、干擾因素眾多等特點的典型復雜體系。中藥復方通過君臣佐使各味藥材之間的配伍組合,針對疾病的病因病機,通過適當?shù)慕o藥途徑被吸收入血,整體協(xié)同互濟達到治療疾病的目的。溫絡方是類風濕性關節(jié)炎濕寒阻絡證的代表方劑。
　　 溫絡方由白術、卷柏、附子、桂枝組成,為治療類風濕關節(jié)炎的驗方。為揭示溫絡方的藥效物質基礎,提高整方的質量控制手段,本論文采用HPLC-DAD-M

2、Sn的技術手段研究了溫絡方主要的藥效物質基礎,具體研究內容如下所示:
　　 第一部分文獻綜述
　　 總結了溫絡方的臨床應用和現(xiàn)代研究,并對溫絡方復方的四個單味藥白術、卷柏、附子以及桂枝的化學成分進行了綜述。共引用參考文獻66篇。
　　 第二部分溫絡方中卷柏化學成分的定性研究
　　 首先建立了溫絡方中卷柏藥材的液質聯(lián)用定性分析方法。應用HPLC-DAD-MSn技術對卷柏中主要的雙黃酮類化合物進行了鑒定。通過

3、對含有三種雙黃酮母核(穗花杉雙黃酮、羅伯斯塔雙黃酮、扁柏雙黃酮)的7個標準品質譜裂解途徑及紫外吸收光譜進行的研究,總結出了卷柏中主要三類雙黃酮的質譜裂解規(guī)律與紫外吸收特征。并據(jù)此鑒定出卷柏藥材中17個雙黃酮化合物,其中5個化合物為卷柏中未見報道的成分。卷柏主要成分的鑒定為溫絡方全方定性以及其他富含雙黃酮藥材成分的快速鑒定奠定了基礎。
　　 第三部分溫絡方中自術化學成分的定性研究
　　 建立了溫絡方中自術藥材的液質聯(lián)用定性

4、分析方法。首先使用高分辨質譜對白術內酯Ⅰ、白術內酯Ⅱ、白術內酯Ⅲ的質譜裂解規(guī)律進行了深入的研究。后采用HPLC—DAD-MSn技術對白術藥材中主要的化合物進行了鑒定。共檢測出40個化合物,鑒定出其中的18個成分,其中3個未在白術的化學成分報道過,并推測出另外16個化合物的結構類型。鑒定出的化合物包括9個倍半萜內酯類成分以及9個聚烯炔類成分。白術HPLC-DAD-MSn分析條件的建立及主要化合物的分析鑒定,為溫絡方全方定性以及蒼術屬藥材成

5、分的快速鑒定奠定了基礎。
　　 第四部分溫絡方藥效物質基礎的研究
　　 1、溫絡方化學成分的定性研究
　　 在對白術及卷柏化學成分定性研究的基礎上,采用HPLC-DAD-MSn技術對溫絡方的主要化學成分進行了分析,檢測出48個化合物,鑒定推測出其中的44個化合物,包括12個來源于白術的倍半萜與聚乙炔成分；11個來源于卷柏的雙黃酮與炔酚成分；15個來源于附子的生物堿類成分；6個來源于桂枝的苯丙素類小分子化合物。復方

6、的定性研究工作為下一步復方入血研究及主要成分定量研究奠定了基礎。
　　 2、溫絡方活性部位入血移行成分初步研究
　　 采用HPLC-DAD-MSn技術對溫絡方的入血移行成分進行了初步研究。通過比較含藥血漿、空白血漿、溫絡方活性部位的質譜信息,發(fā)現(xiàn)了10個以原型入血的化合物,包括來自白術的倍半萜內酯成分、來自卷柏的雙黃酮成分、來自于附子的二萜類生物堿成分以及來自于桂枝的苯丙素類小分子化合物,尤其以來自白術及桂枝的小分子成分