液質聯(lián)用技術應用于小柴胡湯藥效物質基礎研究.pdf

1、本文采用高效液相色譜飛行時間質譜聯(lián)用技術，建立了快速鑒別小柴胡湯中化學成分的分析方法。同時建立了中藥復方小柴胡湯的化學成分數(shù)據(jù)庫，其中收納了小柴胡湯中七味藥材已知的化學成分400多個，并計算出其精確分子量，其中包括皂苷類成分，如柴胡皂苷和甘草皂苷；黃酮類成分如黃芩苷、漢黃芩苷和甘草甘；生物堿類成分，如麻黃堿；以及二苯庚烷類和姜辣素類等成分。在小柴胡湯總離子流圖中，共鑒別出38個化合物，其中鑒別出甘草中化學成分17個、黃芩中化學成分10個

2、、人參中化學成分4個、柴胡中化學成分4個、生姜中化學成分3個，半夏和大棗未檢出。從小柴胡湯的定性結果可以看出，小柴胡湯中含有多種化學成分，其中含量最高的為黃酮類化學成分，主要來自于黃芩和甘草，在液相色譜上較早出峰。皂苷類成分也是小柴胡湯中重要的化學成分，可能由于其極性較小的緣故，在液相色譜中較后出峰。這些成分在小柴胡湯中的含量較高，且為生物活性物質，可為小柴胡湯藥效物質基礎研究奠定基礎。 2005年版中國藥典中以黃芩苷的含量作為

3、小柴胡顆粒質量控制的標準。由于有較好的紫外吸收，黃酮類化合物的含量測定多采用紫外檢測器。小柴胡湯中黃芩苷、漢黃芩苷含量較高，其含量的多少對小柴胡湯質量影響顯著。本文用回流提取的方法，按照原方比例制備小柴胡湯。采用高效液相色譜紫外檢測器，Agilent Zorbax XDB-C18(150mm×4.6mm，5μm)色譜柱，流動相為乙腈-水系統(tǒng)，對小柴胡湯中黃芩苷、漢黃芩苷進行含量測定。與藥典相比，增加了對漢黃芩苷的測定。本方法可以用于不同

4、制劑小柴胡湯的質量控制研究，也為藥物代謝及藥物動力學研究奠定基礎。 多數(shù)中藥以湯劑的形式口服給藥。實際上，這種傳統(tǒng)復方在發(fā)揮藥效作用之前，除了在炮制、煎煮過程中會產生動態(tài)變化外，進入機體后亦要發(fā)生動態(tài)變化。本文采用HPLC-MS方法測定口服給藥小柴胡湯后，大鼠血漿中黃芩苷和漢黃芩苷的含量，所建立含量測定方法簡便可靠，血漿中內源性物質均不干擾樣品峰，方法學驗證結果表明該含量測定方法適合于生物樣品中黃芩苷和漢黃芩苷的含量測定。該方法