復方中藥芪參益氣滴丸化學物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機理研究.pdf

1、復方中藥是當今中醫(yī)臨床治療用藥的重要手段，一個療效經(jīng)得起實踐檢驗的復方中藥蘊含著科學的配伍規(guī)律，體現(xiàn)著中醫(yī)學獨特的醫(yī)理和思辨。但由于復方中藥的復雜性，大部分復方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理機制尚不明確，嚴重影響了中醫(yī)藥的推廣和使用。如何明確復方中藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制是當前中藥現(xiàn)代化亟待解決的問題。芪參益氣滴丸是以現(xiàn)代科技提取丹參、黃芪、三七和降香中的有效成分精制而成的滴丸制劑，具有劑量小、服用方便、溶出速度快，可經(jīng)粘膜吸收入血、生物利用度

2、高及無胃腸刺激、無明顯毒副作用的特點。能夠顯著改善心肌損傷、心功能減退的各種癥狀，適用于慢性心功能不全、心肌炎及后遺癥、心肌梗死恢復期、心肌纖維化等病癥的治療。但其藥效作用的化學物質(zhì)基礎(chǔ)和作用的機理尚不清楚，需要結(jié)合現(xiàn)代新技術(shù)向更深層次的研究。
　　 本研究引入整合化學物質(zhì)組學的整體系統(tǒng)生物學研究策略，全面系統(tǒng)的探討芪參益氣滴丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制。首先，采用化學物質(zhì)組學(Chemomics)的研究方法，對其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)進行

3、系統(tǒng)的研究。應(yīng)用先進的UPLC/Q-TOF分離分析技術(shù)，對芪參益氣滴丸的整體化學物質(zhì)組(Globalchemome)進行了深入研究，共分析鑒定了藥物中的44個化學成分，達到了從整體上明晰藥物藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的目的。在此基礎(chǔ)上，建立了高效、快速的用于藥物質(zhì)量控制的指紋圖譜，并采用主成分分析法(PCA)對不同批次芪參益氣滴丸的質(zhì)量進行研究，確定了藥物質(zhì)量控制的關(guān)鍵點為降香揮發(fā)油成分，建立了對其質(zhì)量控制的數(shù)學模型。
　　 在藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研

4、究中，首先采用計算機預測計算(in Silico)、對芪參益氣滴丸中可被機體吸收的成分進行計算預測，確定了其化學物質(zhì)基礎(chǔ)中可能的16種有效成分；然后分別采用外翻腸囊實驗和Caco-2單層細胞實驗等體外研究（inVitro）的方法，在離體器官水平和細胞水平對芪參益氣滴丸的吸收進行研究，確定了42種可被吸收的原型成分和6種代謝產(chǎn)物；進而在活體動物水平采用體內(nèi)(in Vivo)研究的方法，對大鼠灌胃給藥前后的血漿、尿液和糞便總成分指紋圖譜進行

5、分析，通過灌胃前后的對比找出芪參益氣滴丸被吸收入血的成分。最后，通過分析對比芪參益氣滴丸分別在計算水平、細胞水平、離體器官水平以及動物水平能夠被吸收入血的成分和代謝產(chǎn)物，通過四個逐步深入的層次的研究相互輔助，相互驗證，確定了芪參益氣滴丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　 在此基礎(chǔ)之上，以Caco-2單層細胞為實驗?zāi)Ｐ停隗w外吸收的層面上考察了芪參益氣滴丸藥材配伍對于主要成分吸收的影響。實驗共選取四味藥材中具有代表性的十種主要成分為考察對象，

6、分別考察其在單獨給藥、與其它藥材配伍和整體復方給藥時的吸收情況。結(jié)果顯示，丹參、三七與黃芪、降香配伍應(yīng)用能增加酚酸類和皂苷類成分的吸收速率，減慢黃芪和降香揮發(fā)油有效成分吸收速率。丹參、三七有效成分吸收加快有利于增強活血化瘀效果，緩解臨床癥狀；黃芪有效成分吸收速率減慢則在不影響活血化瘀效果基礎(chǔ)之上更增補中益氣之功，揮發(fā)油減慢吸收速率則更發(fā)揮其佐使之功。
　　 在明確芪參益氣滴丸藥效物質(zhì)基礎(chǔ)上，采用代謝組學的研究方法對給藥干預心肌梗

7、死大鼠的內(nèi)源性代謝產(chǎn)物變化進行了研究。結(jié)果顯示，藥物干預組與模型組分離，靠近假手術(shù)組，從代謝角度證明了大鼠心肌梗死模型制備的質(zhì)量和芪參益氣滴丸對于心肌梗死疾病的治療作用。實驗篩查出組間差異性顯著的25個潛在生物標志物。涉及能量代謝、磷脂代謝、脂肪酸代謝紊亂以及其導致的血小板聚集等多個方面的代謝障礙，可能是心肌梗死發(fā)病與治療的重要機制。
　　 通過本項目研究，基本明確芪參益氣滴丸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，并從代謝角度初步探討了其作用機制，為