中藥復(fù)方海藻制劑藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究.pdf

1、中藥復(fù)方是中醫(yī)用藥的主要形式，是基于辯證觀點(diǎn)，按照君臣佐使的組方原則選擇藥物定量配伍而成，是中醫(yī)辯證論治理論的具體體現(xiàn)。由于復(fù)方化學(xué)成分和藥效作用的復(fù)雜性，以及有效成分對機(jī)體的多靶點(diǎn)協(xié)同作用，使復(fù)方效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)研究十分困難。如何對中藥復(fù)方藥效成分及其藥效作用機(jī)理做出科學(xué)的詮釋，是本領(lǐng)域亟待解決的重要學(xué)術(shù)問題。本研究選擇臨床有效的抗腫瘤復(fù)方海藻制劑，采用整方研究策略，從多成分、多靶點(diǎn)、多途徑闡釋復(fù)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，初步探討了復(fù)方的抗腫瘤作

2、用機(jī)制。 中藥復(fù)方海藻制劑是由海藻、黃芪、女貞子等傳統(tǒng)中藥，依據(jù)中醫(yī)藥組方原理配伍而成的抗腫瘤復(fù)方制劑。本研究采用整方研究策略，以體外免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞毒、抗氧化等抗腫瘤相關(guān)的活性為指導(dǎo)，運(yùn)用色譜分離技術(shù)(硅膠柱層析、凝膠柱層析、制備薄層色譜和制備高效液相色譜等技術(shù))和波譜分析技術(shù)(1H NMR，13C NMR，2D NMR，MS，IR，UV等技術(shù))，從復(fù)方水煎液的乙酸乙酯相和正丁醇相中分離得到60個(gè)單體化合物，鑒定了49個(gè)化合物的

3、結(jié)構(gòu)，其中2個(gè)為新化合物，1個(gè)為新天然產(chǎn)物，包括黃酮苷類、黃酮類、酚類、木脂素類、甾體類、萜類、內(nèi)酯類等近10種結(jié)構(gòu)類型。運(yùn)用GC/MS分析技術(shù)從石油醚相中鑒定了15個(gè)脂肪酸類化合物，6個(gè)倍半萜及甾體類等化合物。從水相中分離獲得以葡萄糖為主構(gòu)成的雜多糖，運(yùn)用GC分析技術(shù)鑒定出單糖組成主要為葡萄糖，并有少量的鼠李糖、巖藻糖、甘露糖及半乳糖。 以與腫瘤密切相關(guān)的多個(gè)靶點(diǎn)，分別在細(xì)胞水平(細(xì)胞增殖，細(xì)胞毒)和分子水平(細(xì)胞因子IL-2

4、，IL-4，INF-γ)上，探討了復(fù)方化學(xué)成分的抗腫瘤作用。發(fā)現(xiàn)，復(fù)方海藻制劑是一個(gè)化學(xué)成分復(fù)雜的有機(jī)整體，通過多種途徑產(chǎn)生抗腫瘤作用。黃酮苷類、黃酮類、酚類和多糖類成分是復(fù)方抗腫瘤作用的主要分子群。黃酮及其苷類化合物具有顯著的免疫激活作用；黃酮及其苷類以及咖啡酸衍生物還顯示強(qiáng)抗氧化作用；多糖類化合物則表現(xiàn)出對免疫細(xì)胞功能起調(diào)節(jié)和促進(jìn)作用。這4類有效分子群相互配合，協(xié)同作用，加上復(fù)方其他化學(xué)成分的輔助作用(如脂肪酸類及倍半萜類化合物弱的

5、細(xì)胞毒作用)，體現(xiàn)綜合效力，從而發(fā)揮整體復(fù)方的多成分、多靶點(diǎn)、多途徑的抗腫瘤作用。 為追蹤復(fù)方化合物的來源，從君藥海藻海蒿子Sargassum pallidum(Turn．)C．Ag．中分離得到了22個(gè)單體化合物，鑒定了18個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)了與復(fù)方化合物結(jié)構(gòu)相似的黃酮類及甾體類化合物。從臣藥女貞子中分離鑒定了7個(gè)化合物，發(fā)現(xiàn)復(fù)方酚苷類化合物β-glucopyranoside，2-(4-hydroxyphenyl)，6-ace

6、tate(44)來源于女貞子，不是復(fù)方合煎的產(chǎn)物；推測復(fù)方內(nèi)酯類化合物(3-Ethylidene-2-oxo-tetrahydro-pyran-4-yl)-acetic acid methyl ester(42)和[5-(1-Hydroxyl-ethyl)-4-hydroxymethylene-2-oxo-tetrahydro-pyran-3-yl]-acetic acidmethyl ester(43)可能是女貞子中的裂環(huán)環(huán)烯醚萜類化