烏司他丁對(duì)燒傷早期“休克心”的防治作用及其機(jī)理研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)采用臨床研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的方法，旨在探討烏司他丁對(duì)燒傷“休克心”的防治作用及其機(jī)制，為臨床防治燒傷“休克心”提供一種選擇和可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 材料與方法:一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)健康SD大鼠72只，體重(230±20)g，雌雄不拘，隨機(jī)等分為2組：?jiǎn)渭儫齻M(B組，n=36)；烏司他丁處理組(U組，n=36)。各組又分為燒傷前及燒傷后1、3、6、12、24h等6個(gè)時(shí)相點(diǎn)，各組每時(shí)相點(diǎn)6只動(dòng)物。 單純燒傷組(B組)模型制

2、備：燒傷模型制備按本所常規(guī)方法進(jìn)行：1％異戊巴比妥鈉(40mg/kg體重)腹腔注射麻醉，按大鼠體重計(jì)算其30％體表面積大小，背部剃毛，將剃毛區(qū)置于98℃水浴中18秒，造成30％TBSAⅢ°燙傷(病理切片證實(shí))。燙傷后即按Parkland公式(4.0ml/kg/1％燒傷面積)腹腔注射等滲鹽水抗體克，于傷后即刻和傷后4h共注入24h總量的一半，傷后8、12、16、20h注入另一半。燒傷后動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，自由飲水、進(jìn)食。 烏司他丁處理組

3、(U組)同上法制成燒傷模型，于燙傷后，即刻腹腔注射烏司他丁4萬(wàn)單位/kg。 標(biāo)本采集與處理：分別于燙傷前及燙傷后1、3、6、12和24小時(shí)各個(gè)時(shí)相點(diǎn)處死大鼠采集腹主動(dòng)脈血?？鼓蛛x血漿后于-20℃凍存待測(cè)。無(wú)菌留取心肌組織液氮凍存待檢。心肌組織切片，光鏡下觀察心肌組織病理形態(tài)改變；心肌組織TUNEL染色，觀察心肌細(xì)胞凋亡情況。采用ELISA法測(cè)定血漿cTnI、PMNElastase的含量，全自動(dòng)生化儀檢測(cè)CK-MB。同時(shí)檢測(cè)心肌

4、組織勻漿液MDA(硫代巴比妥酸法比色法)、TNF-α(ELISA法)、IL-10(ELISA法)和心肌組織caspase-3活性(熒光測(cè)定法)，并觀察心肌細(xì)胞凋亡情況(TUNEL法)。 二、臨床研究采用臨床前瞻性研究，選擇燒傷后24小時(shí)內(nèi)入院、燒傷面積50％以上的特重?zé)齻∪?4例，年齡21至56歲，分為對(duì)照組(B組)和烏司他丁治療組(U組)，每組各17例。所有患者既往都無(wú)心臟病史。兩組病人均進(jìn)行常規(guī)治療，U組病人入院即給予烏司

5、他丁10萬(wàn)U靜脈滴注，每日三次，連續(xù)一周。所有被觀察病人在燒傷后2、4、7天抽取靜脈血3ml，抗凝離心收集血漿檢測(cè)cTnI(心肌肌鈣蛋白Ⅰ)和CK-MB(肌酸激酶同工酶-MB)。 結(jié)果:一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.血漿cTnI、CK-MB含量：燙傷后3、6、12、24小時(shí)大鼠血漿cTnI、CK-MB均顯著高于傷前(p＜0.01)，U組各時(shí)相點(diǎn)cTnI、CK-MB均顯著低于B組(p＜0.01或p＜0.05)。 2.心肌組織TNF-

6、a含量：燙傷后3、6、12、24h大鼠心肌組織TNF-a含量均顯著高于傷前(p＜0.01)；U組在燒傷后明顯低于B組的相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)(p＜0.01)，并在24h基本降至正常(P＞0.05)。 3.心肌組織IL-10含量：在燙傷后1、3、6、12、24h大鼠心肌組織IL-10含量均明顯升高(p＜0.01)；與B組相比，U組在傷后3、6、12、24h時(shí)相點(diǎn)顯著高于B組(p＜0.01)。 4.心肌組織MDA含量：燒傷后3、6、12

7、、24hB組MDA顯著高于傷前(p＜0.01)；U組在傷后3h、6h與傷前比較無(wú)顯著差異(p＞0.05)，12h及24h明顯增高(p＜0.05或p＜0.01)，但顯著低于B組(p＜0.01)。 5.心肌組織中caspase-3活性：心肌組織中caspase-3活性均明顯增強(qiáng)(p＜0.01或p＜0.05)，但B組明顯高于U組(p＜0.01或p＜0.05)。燙傷后6、12和24h，兩組大鼠caspase-3與心肌凋亡指數(shù)變化相一致。

8、 6.心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)變化：燙傷前兩組大鼠心肌未見(jiàn)凋亡陽(yáng)性細(xì)胞，燙傷后3h可見(jiàn)到少量心肌細(xì)胞凋亡，傷后6、12、24h凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增多，心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)明顯高于U組。 7.組織病理學(xué)觀察：傷后3h，光鏡下可見(jiàn)心肌纖維腫脹，橫紋紊亂，細(xì)胞界限不清、消失，胞漿破壞，細(xì)胞間質(zhì)水腫以及毛細(xì)血管擴(kuò)張充血、紅細(xì)胞滲出等炎癥表現(xiàn)，傷后6-12h病變加重，可見(jiàn)心肌組織點(diǎn)片狀溶解灶等。烏司他丁處理組病變顯著減輕。 二、臨

9、床研究結(jié)果1.血漿cTnI含量：燒傷后2、4和7天兩組病人均明顯高于正常(p＜0.01)；但烏司他丁治療組(U組)于燒傷后第4和第7天明顯低于B組(p＜0.01或p＜0.05)。 2.血漿CK-MB含量：燒傷后2、4和7天血漿CK-MB均明顯高于正常(p＜0.01)；UTI治療組(U組)CK-MB于燒傷后第2、4和7天明顯低于B組(p＜0.01或p＜0.05)，并于第7天降至正常(p＞0.05)。 3.血漿PMN彈性蛋白

10、酶含量：燒傷后2、4和7天PMN彈性蛋白酶均明顯高于正常(p＜0.01)；U組病人在各個(gè)時(shí)相點(diǎn)均明顯低于B組(p＜0.01或p＜0.05)。 討論與結(jié)論:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與臨床研究均表明，嚴(yán)重?zé)齻麜r(shí)發(fā)生了明顯的心肌損害。烏司他丁能夠明顯減輕嚴(yán)重?zé)齻麜r(shí)心肌損害的程度，有效地防治燒傷“休克心”。 烏司他丁對(duì)燒傷后心肌保護(hù)作用的機(jī)制是多方面的，根據(jù)本實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果，有以下幾個(gè)方面： 嚴(yán)重?zé)齻麜r(shí)，烏司他丁能夠明顯減少促炎介質(zhì)的釋