IGFBP在肝纖維化肝硬化患者中的作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：探討胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白(IGFBP)在肝纖維化肝硬化中的作用及其機(jī)制。 方法：42例肝組織標(biāo)本病理切片按常規(guī)方法進(jìn)行HE和VG染色，按《2000年病毒性肝炎防治方案》診斷肝纖維化和肝硬化并分組，其中肝纖維化組18例，肝硬化組18例，對照組6例為手術(shù)切除的肝血管瘤外的正常肝組織。之后通過免疫組織化學(xué)的方法觀察各組肝組織中TGFβ1、TGFRⅠ、IGFBP2、6、7(rp1)及CD14的表達(dá)，并將其通過圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行半

2、定量分析。收集33例肝硬化患者和6例健康人的外周靜脈血，采用雙抗體夾心ELISA法檢測血漿中IGFBP1、3和TGFβ1的水平；同時(shí)采用鱟試驗(yàn)三肽基質(zhì)顯色法測定血漿內(nèi)毒素的水平；采用全自動生化分析儀常規(guī)方法測定肝臟生化指標(biāo)。用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。 結(jié)果：1.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果： IGFBP2在對照組正常肝組織中僅見少數(shù)肝細(xì)胞、中央靜脈及膽管的管壁處有少量陽性染色，在肝纖維化組和肝硬化組中，可見肝竇內(nèi)及

3、纖維間隔周圍的肝細(xì)胞有較強(qiáng)的陽性染色；IGFBP6和IGFBP7(rP1)在對照組正常肝組織中見極少數(shù)肝細(xì)胞有陽性染色，在肝纖維化組和肝硬化組中，可見肝竇內(nèi)和纖維間隔內(nèi)的肝星狀細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、枯否細(xì)胞以及纖維間隔周圍的少數(shù)肝細(xì)胞有較強(qiáng)的陽性染色。 2.免疫組織化學(xué)染色圖像分析結(jié)果： IGFBP2、IGFBP6和IGFBP7(rp1)在肝纖維化組和肝硬化組的IOD值比對照組明顯升高(3475.6±2559.9，12701

4、.2±1832.1vs580.2±83.5，P＜0.05；1641.1±1236.7，5366.5±2444.3vs327.9±92.4，P＜0.05；1002.7±598.5，4001.4±2651.5vs273.3±81.3，P＜0.05)；同時(shí)其在肝硬化組的IOD值也明顯高于肝纖維化組(12701.2±1832.1vs3475.6±2559.9，P＜0.01；5366.5±2444.3vs1641.1±1236.7，P＜0.01；

5、4001.4±2651.5vs1002.7±598.5，P＜0.01)。 3.免疫組織化學(xué)染色圖像分析結(jié)果相關(guān)分析： 3.1肝組織IGFBP2、6、7(rP1)的表達(dá)分別與肝組織膠原纖維的表達(dá)呈正相關(guān)(r值分別為0.582、0.617、0.627，P值均＜0.001)； 3.2肝組織IGFBP2、6、7(rP1)的表達(dá)分別與肝組織TGFβ1的表達(dá)呈正相關(guān)(r值分別為0.496、0.498、0.374，P值均＜0.

6、001)； 3.3肝組織IGFBP2、6、7(rP1)的表達(dá)分別與肝組織TGFRI的表達(dá)呈正相關(guān)(r值分別為0.530、0.428、0.418，P值均＜0.001)； 3.4肝組織IGFBP2、6、7(rP1)的表達(dá)分別與肝組織CD14的表達(dá)呈正相關(guān)(r值分別為0.605、0.456、0.428，P值均＜0.001)。 4.血清學(xué)檢測結(jié)果： 肝硬化忠者血清ALT的水平明顯增高[(39.3±20.46)u/

7、lvs(18.25±6.39)u/l，P＜0.05]，而血清AST、GLDH的水平與正常對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(47.14±30.22)u/lvs(19.33±8.5)u/l，P＞0.05；(8.62±9.29)u/lvs(5.3±1)u/l，P＞0.05]。肝硬化患者血漿IGFBP1、TGFβ1和內(nèi)毒素水平明顯增高[(10985.37±8374.01)ng/mlvs(3360.63±829.13)ng/ml，P＜0.05；(11

8、.87±9.9)ng/mlvs(3.3±1.08)ng/ml，P＜0.05；(0.687±0.352)ng/mlvs(0.056±0.007)ng/ml，P＜0.05]；而血漿IGFBP3的水平則明顯降低[(440.2±421.19)ng/mlvs(3287.97±1158.02)ng/ml，P＜0.001]。血漿IGFBP3的水平與血漿TGFβ1的水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.468，P＜0.01)，血漿IGFBP3的水平與血漿內(nèi)毒素的水平

9、也呈負(fù)相關(guān)(r=-0.355，P＜0.05)。 結(jié)論：1.IGFBP2、6、7(rp1)在肝纖維化肝硬化患者肝組織的表達(dá)增高，而且隨著病變程度加重逐漸增高，同時(shí)肝硬化患者血漿IGFBP1的水平明顯增高，血漿IGFBP3的水平明顯降低，說明IGFBP在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展中可能起有重要作用。 2.TGFβ1是現(xiàn)知最強(qiáng)有力的肝纖維化促進(jìn)因子，TGFβ1、TGFRⅠ在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮了核心作用。肝組織IGFBP2、6

10、、7(rp1)的表達(dá)和肝組織TGFβ1、TGFRⅠ的表達(dá)呈正相關(guān)；肝硬化患者血漿IGFBP3的水平和血漿TGFβ1的水平呈負(fù)相關(guān)。IGFBP與TGFβ1有一個(gè)伴隨關(guān)系，提示IGFBP對肝纖維化的發(fā)生可能起著重要作用。 3.目前已公認(rèn)內(nèi)毒素血癥在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展中起有重要作用，CD14是內(nèi)毒素的高親合受體。肝組織IGFBP2、6、7(rp1)的表達(dá)和肝組織CD14的表達(dá)呈正相關(guān)；肝硬化忠者血漿IGFBP3的水平和血漿內(nèi)毒素的水平