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1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文夏枯草抗淋巴造血系統(tǒng)腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名:張可杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:張明智王慶端20030510挫!:H態(tài)坐(2QQ3屆2姒氆生生業(yè)論文夏主占堇垃濫巴造血丕統(tǒng)肚瘟佳目的宏驗(yàn)互!究果酸及衍生物對(duì)PLl=!I。和人體肺腫瘤細(xì)胞A一549均具有顯著細(xì)胞毒作用。本實(shí)驗(yàn)對(duì)夏枯草抗淋巴造血系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞的作用進(jìn)行了研究。本研究以人紅白血病細(xì)胞系K562、人B淋巴瘤白血病細(xì)胞系Raji、人T淋巴瘤白血病細(xì)胞系J
2、urkat為靶細(xì)胞,研究了夏枯草經(jīng)水煎醇沉法制成的夏枯草注射液對(duì)三種細(xì)胞增殖的影響,并運(yùn)用細(xì)胞生物學(xué)的方法剝夏枯草注射液誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡的特點(diǎn)及可能機(jī)制進(jìn)行了初步探討,為臨床應(yīng)用夏枯草治療淋巴造血系統(tǒng)腫瘤提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法1用MTT法測(cè)定夏枯草注射液對(duì)K562細(xì)胞、Raji細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率。實(shí)驗(yàn)分三組:①實(shí)驗(yàn)組:加入不同濃度的夏枯草注射液:②陽(yáng)性對(duì)照組:加入不同濃度的阿霉素;③空白對(duì)照組:加入等體積的生理鹽水。每個(gè)
3、濃度設(shè)四個(gè)平行孔,分別作用于K562細(xì)胞、Raft細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞48d時(shí)后,測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率,計(jì)算出IC5,值。同時(shí),用婀T法繪制兩種濃度夏枯草注射液(50mg/ml,lOOmg/m1)作用于K562細(xì)J旭、Raji細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,設(shè)空白對(duì)照組(加入同體積的生理鹽水)。以上實(shí)驗(yàn)各重復(fù)3次,求平均值。2。用倒置顯微鏡、姬姆薩染色法、婀T染色法光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),臺(tái)盼藍(lán)拒染法、流式細(xì)胞儀PI染色觀察夏枯草注射液對(duì)
4、K562細(xì)胞的促凋亡活性,用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)夏枯草注射液對(duì)凋亡相關(guān)蛋芻bcl2、bax蛋白表達(dá)的影響,并用圖文分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析。結(jié)果1_夏枯草注射液對(duì)3種腫瘤細(xì)胞的抑制作用11夏枯草注射液時(shí)K562細(xì)胞、Raji細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用,IC(實(shí)際夏枯草濃度)分別為0113mg/mL、0118mg/mL、0143mg/m1,符合南美抗腫瘤藥物研發(fā)辦公室制定的IC?!?0mg/ml認(rèn)為有效的標(biāo)準(zhǔn)。三種細(xì)胞各實(shí)驗(yàn)組
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