從T細(xì)胞免疫應(yīng)答的初始階段研究TLR-4和B7-H1在膀胱癌免疫逃逸中的作用及臨床意義.pdf

1、摘要樹突狀細(xì)胞(dendriticcell，DC)是體內(nèi)已知功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞(antigenpresentingcell，APC)，能夠刺激初始T細(xì)胞活化，它可誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)，間接或直接殺傷腫瘤細(xì)胞從而實(shí)現(xiàn)機(jī)體免疫系統(tǒng)抗腫瘤的作用。程序性死亡配體1(Programmeddeathligand一1，PDL1)(亦稱B7一H1)，是B7共刺激分子超家族的重要成員之一。學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)B7一Hl與其受體PD一1(progr

2、ammed—death一1)結(jié)合后可抑制初始T細(xì)胞活化、增殖以及效應(yīng)T細(xì)胞細(xì)胞因子的分泌，從而能降低機(jī)體免疫應(yīng)答的能力，這種機(jī)制在腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸過程中發(fā)揮極其重要的作用，同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)活化的TLR4受體介導(dǎo)的信號通路可以激活DC細(xì)胞，亦可引起樹突狀細(xì)胞B7H1的高表達(dá)。目的：研究膀胱癌患者外周血DC細(xì)胞表面TLR一4和B7一H1、CD8T細(xì)胞表面PD—l的表達(dá)水平表達(dá)情況，相互之間的關(guān)系及其與膀胱癌病理分級、臨床分期等生物學(xué)指標(biāo)的相關(guān)

3、性。這對于將來臨床上膀胱腫瘤標(biāo)記物檢測的開展具有重要意義方法：收集30例膀胱癌患者、7例正常人外周血臨床樣本，分離膀胱癌患者及正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)，聯(lián)合培養(yǎng)后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測DCs表面B7H1、TLR一4及CD8T細(xì)胞表面PD一1的表達(dá)情況。結(jié)果：膀胱癌患者外周血DCs表面B7一Hl表達(dá)水平及CD8T細(xì)胞表面PD一1表達(dá)水平均明顯高于正常人，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義(PO01)，并且二者的表達(dá)水平隨著病理分級和臨床分期的增加均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P005)。外周血Des表面TLR4表達(dá)水平明顯高于正常人，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO05)。結(jié)論：在膀胱癌發(fā)生發(fā)展過程中存在著DCs表面TLR一4表達(dá)增高、B7一H1和CD8T細(xì)胞表面PD1分子表達(dá)的上調(diào)，B7一H1／PD1信號通路可能在T細(xì)胞免疫應(yīng)答的初始階段亦參與了膀胱癌免疫逃逸的發(fā)生。指導(dǎo)教師于芹超副教授碩士研究生紀(jì)傳彪關(guān)鍵詞：膀胱腫瘤；B7

5、_H1；PD1；TLR_4；DC；CD8T細(xì)胞；免疫逃逸目錄引言l1材料與試劑311臨床資料一312主要試劑”313實(shí)驗(yàn)儀器一42實(shí)驗(yàn)方法及步驟621膀胱癌患者PBMC及DCs的分離與培養(yǎng)622正常人外周血單核細(xì)胞來源DC的誘導(dǎo)623流式細(xì)胞術(shù)檢測mOCs表面B7H1、TLR一4及CD8T細(xì)胞表面PD1的表達(dá)水習(xí)F724統(tǒng)計(jì)與分析”73實(shí)驗(yàn)結(jié)果831樹突狀細(xì)胞的分離與培養(yǎng)一832B7H1、TLR4和PD1在正常人及膀胱癌患者外周血mDC