B7-H4在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)及其與免疫逃逸機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　1、探討B(tài)7-H4在膀胱尿路上皮癌組織及血清中的表達(dá)及其臨床意義;
　　2、研究封閉B7-H4通路對(duì)活化的T淋巴細(xì)胞體外抗膀胱癌BIU-87細(xì)胞作用的影響。
　　方法:
　　1.1、采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)49例膀胱尿路上皮癌患者癌組織及對(duì)應(yīng)癌旁組織中B7-H4蛋白的表達(dá),觀察B7-H4蛋白的表達(dá)水平與患者臨床病理指標(biāo)之間的相關(guān)性;
　　1.2、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)45例膀胱尿

2、路上皮癌患者和45例健康對(duì)照組血清中可溶性B7-H4蛋白(sB7-H4)表達(dá)量變化,觀察sB7-H4的表達(dá)水平與患者臨床病理指標(biāo)之間的相關(guān)性;
　　2.1、細(xì)胞免疫化學(xué)染色方法檢測(cè)膀胱癌BIU-87細(xì)胞B7-H4的表達(dá);
　　2.2、體外分離、純化和活化T淋巴細(xì)胞;
　　2.3、B7-H4單克隆抗體封閉BIU-87細(xì)胞,細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)法(CCK-8法)檢測(cè)封閉B7-H4通路后活化的T淋巴細(xì)胞對(duì)BIU-87細(xì)胞的細(xì)胞

3、毒作用影響。
　　結(jié)果:
　　1.1、膀胱尿路上皮癌組織中B7-H4陽(yáng)性表達(dá)率為(24/49)49.0％,而癌旁膀胱組織中無(wú)B7-H4蛋白的表達(dá)(P<0.05),其表達(dá)與患者的腫瘤TNM分期和組織學(xué)分級(jí)密切相關(guān),肌層浸潤(rùn)組和組織學(xué)高分級(jí)組分別顯著高于非肌層浸潤(rùn)組和低分級(jí)組(P<0.05)。
　　1.2、膀胱尿路上皮癌患者血清中sB7-H4的濃度較正常人顯著提高(P<0.05),組織學(xué)分級(jí)高分級(jí)的患者表達(dá)量顯著高于低分級(jí)

4、患者(P<0.05);
　　2.1、膀胱癌BIU-87細(xì)胞上有B7-H4蛋白的表達(dá);
　　2.2、體外成功分離、純化并活化出T淋巴細(xì)胞;
　　2.3、封閉B7-H4通路后活化的T淋巴細(xì)胞對(duì)BIU-87細(xì)胞的殺傷活性明顯較未封閉組增強(qiáng)(P<0.05),且呈劑量依賴性。
　　結(jié)論:
　　B7-H4在膀胱尿路上皮癌患者癌組織及血清中表達(dá)上調(diào),與患者TNM分期及組織學(xué)分級(jí)密切相關(guān),在膀胱尿路上皮癌的發(fā)生發(fā)展及免疫逃