Ph-SA對金黃色葡萄球菌agr系統(tǒng)活性影響的初步研究.pdf

1、Ph-SA是本實(shí)驗(yàn)室以大腸菌素Ia和金黃色葡萄球菌的信息素AgrD1通過分子生物學(xué)方法構(gòu)建的多結(jié)構(gòu)域融合抗菌多肽。AgrD1可以將原本不能識別金黃色葡萄球菌的大腸菌素Ia引導(dǎo)至金黃色葡萄球菌胞膜的親疏水作用區(qū)內(nèi)，大腸菌素Ia的通道形成結(jié)構(gòu)域就可以循親疏水作用插入細(xì)菌胞膜，形成電壓依賴性的離子通道，將細(xì)菌殺死?！　grD是金黃色葡萄球菌密度閾值感應(yīng)系統(tǒng)(agr)的信號分子，當(dāng)其濃度達(dá)到一定的閾值，便會與金黃色葡萄球菌胞膜上的受體結(jié)合，

2、通過二元信號傳導(dǎo)系統(tǒng)啟動基因的表達(dá)，促進(jìn)金黃色葡萄球菌大部分毒力因子的分泌，與金黃色葡萄球菌的致病性密切相關(guān)。Ph-SA是一個(gè)融合蛋白，其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)相當(dāng)于將AgrD1序列的氨基端連接在大腸菌素Ia的羧基端，同天然的AgrD1相比，它對agr系統(tǒng)即金黃色葡萄球菌外毒素的分泌會產(chǎn)生怎樣的作用?對此我們進(jìn)行了初步觀察?！　?shí)驗(yàn)分緩沖液處理組、Ph-SA處理組和青霉素處理組，當(dāng)菌生長液濁度(595nm處的光吸收值，A595)達(dá)到0.2時(shí)，加入相

3、應(yīng)的藥物，于不同的時(shí)間點(diǎn)分別采集樣品，通過高效液相色譜(HPLC)檢測樣品中δ溶血素的分泌量，SDS-PAGE展示藥物作用后胞內(nèi)外蛋白分泌量的變化以及比色法檢測藥物作用后菌液上清溶血能力的變化，來比較Ph-SA對agr系統(tǒng)活性的影響。　　結(jié)果表明：在同一時(shí)間點(diǎn)，Ph-SA處理組金黃色葡萄球菌δ溶血素分泌量要低于其它兩組；SDS-PAGE蛋白電泳譜顯示Ph-SA處理組多數(shù)的蛋白條帶濃度要低于其它兩組；同時(shí)Ph-SA處理組上清的溶血能力也