秦皮素對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌活性及其機(jī)制研究.pdf

1、秦皮素(fraxetin)作為秦皮中天然香豆素類(lèi)化合物，具有消炎、抗菌、抗腫瘤、神經(jīng)保護(hù)等作用，且在臨床應(yīng)用范圍廣，是極其重要并有很大開(kāi)發(fā)利用價(jià)值的中藥材。本論文以金黃色葡萄球菌(StaphyLococcus aureus)為供試菌株，對(duì)秦皮素的抑菌活性及其抑菌機(jī)制進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。研究結(jié)果如下：
　　 1.利用牛津杯法及2，3，5-氯化三苯基四氮嘩(TTC)法測(cè)定秦皮素的抑菌活性結(jié)果表明，秦皮素對(duì)金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抑制作

2、用，其最低抑菌濃度(MIC)為0.01mg/mL。
　　 2.通過(guò)測(cè)定培養(yǎng)液電導(dǎo)率及大分子物質(zhì)含量的變化，對(duì)秦皮素作用菌體后細(xì)胞膜的破壞程度進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示秦皮素可以改變金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜的通透性，但卻不會(huì)破壞細(xì)胞膜的完整性。
　　 3.通過(guò)DAPI熒光染色來(lái)檢測(cè)秦皮素對(duì)菌體DNA、RNA含量的影響，結(jié)果顯示秦皮素作用金黃色葡萄球菌20 h后DNA含量減少40.35％，RNA含量減少43.75％，證明秦皮素可抑制金

3、黃色葡萄球菌核酸的合成。
　　 4.采用SDS-PAGE蛋白譜帶分析秦皮素作用菌體前后可溶性蛋白含量的變化，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，藥物作用20 h后，菌體可溶性蛋白總量減少了55.47％，說(shuō)明秦皮素可抑制菌體內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)的合成。
　　 5.通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳法來(lái)研究秦皮素對(duì)DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶活性的影響。結(jié)果表明藥物對(duì)拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ(TOPOⅠ)和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOPOⅡ)均具有明顯的抑制作用。
　　 6.紫外分光光譜法及瓊