免疫球蛋白IgG對(duì)實(shí)驗(yàn)性癲癇模型影響的機(jī)制探討.pdf

1、目的： 癲癇(Epilepsy)是小兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見疾病之一，臨床表現(xiàn)為突然短暫發(fā)作的腦功能異常，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜、類型多樣、治療困難。 國(guó)內(nèi)外研究證明癲癇與免疫有密切的關(guān)系，不少學(xué)者臨床上應(yīng)用靜脈注射用人免疫球蛋白(Human IntravenotIs Immunoglobulin，IVIG)治療癲癇，結(jié)果發(fā)現(xiàn)IVIG對(duì)部分癲癇有效，但其治療癲癇的機(jī)制目前仍不清楚，且相關(guān)研究多基于臨床觀察，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道很少。

2、 本研究擬在建立腹腔注射印防已毒(Picrotoxin，PTX)點(diǎn)燃癲癇動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，研究免疫球蛋白對(duì)癲癇的治療作用，探討其治療癲癇的機(jī)制，為臨床治療癲癇提供理論依據(jù)。 方法： 用腹腔注射PTX(2mg/kg)點(diǎn)燃Wistar大鼠以建立癲癇動(dòng)物模型。49只大鼠隨機(jī)分為兩組：PTX組(A組，n=41)、正常對(duì)照組(B組，n=8)。PTX組(A組)腹腔注射PTX2mg/kg．d，連續(xù)14d；正常對(duì)照組(B組)不作處理。在

3、實(shí)驗(yàn)第14d，PTX組(A組)根據(jù)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)燃結(jié)果分為兩組：完全點(diǎn)燃組(A1+A2組，n：26)，未完全點(diǎn)燃組(A3組，n=13)；再?gòu)耐耆c(diǎn)燃組中隨機(jī)分為兩組：完全點(diǎn)燃1組(A1組，n=16)，完全點(diǎn)燃2組(A2組，n=10)。完全點(diǎn)燃2組(A2組)腹腔注射PTX 2mg/kg．d，連續(xù)14d；完全點(diǎn)燃1組(A1組)再隨機(jī)分為兩組：丙球治療組(A1t組，n=8)、治療對(duì)照組(Alc組，n=8)。丙球治療組(A1t組)腹腔注射PTX2mg/

4、kg．d，連續(xù)17d，第14d在PTX 60分鐘后開始尾靜脈注射IVIG500mg/kg．d，連用4d；治療對(duì)照組(A1c組)腹腔注射PTX 2mg/kg．d，連續(xù)17d，第14d在PTX 60分鐘開始后尾靜脈注射與IVIG同等體積生理鹽水，連用4d。每日對(duì)大鼠進(jìn)行驚厥強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)級(jí)，在實(shí)驗(yàn)PTX注射結(jié)束24小時(shí)后取海馬腦組織及外周血，然后制作海馬腦組織勻漿，ELISA法檢測(cè)勻漿細(xì)胞因子IFN-γ、IL-6的水平，同時(shí)用ELISA檢測(cè)外周

5、血神經(jīng)元特異性烯醇酶(Neuron specific enolase，NSE)的水平。 結(jié)果： 1.腹腔注射PTX點(diǎn)燃大鼠癲癇動(dòng)物模型的建立：PTX組(A組)在實(shí)驗(yàn)14d內(nèi)死亡2只；實(shí)驗(yàn)14d內(nèi)完全點(diǎn)燃27只，完全點(diǎn)燃率約65.85％。 2.實(shí)驗(yàn)14d內(nèi)PTX組的體重變化：正常對(duì)照組(B組)平均體重隨著日齡增加而增加；PTX組，包括完全點(diǎn)燃組(Al+A2組)、未完全點(diǎn)燃組(A3組)平均體重也隨著日齡增加而增加，但

6、增速明顯較正常對(duì)照組減慢，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而完全點(diǎn)燃組和未完全點(diǎn)燃組兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 3.完全點(diǎn)燃2組(A2組)和未完全點(diǎn)燃組(A3組)大鼠血清NSE及海馬腦組織細(xì)胞因子變化：A2組、A3組兩組血清NSE水平均較B組明顯增高，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而A2組和A3組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。A2組、A3組兩組海馬腦組織IFN—γ含量均較B組明顯增高，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而A2組和A3組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。A2組、A3組、B組的IL-6含量

7、兩兩比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 4.IVIG對(duì)癲癇的治療效果：實(shí)驗(yàn)第14～17d期間，Alt組的驚厥強(qiáng)度較Alc組有減弱；潛伏期前者較后者長(zhǎng)；第17天注射PTX 60分鐘后仍有抽搐發(fā)作的大鼠例數(shù)前者較后者少，結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IVIG治療后，Alt組和Alc組血清NSE水平較B組仍有明顯升高，Alc組血清NSE水平較Alt組有明顯升高，結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Alt組和Alc組海馬腦組織IFN-γ含量較B組有明顯升高，Alc組海馬腦組織

8、IFN-γ含量較Alt組有明顯升高，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Alt組、Alc組、B組的海馬腦組織IL-6含量?jī)蓛杀容^均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論： 1.用腹腔注射PTX(2mg/kg．d×14d)點(diǎn)燃Wistar大鼠，可以成功建立癲癇動(dòng)物模型，完全點(diǎn)燃率為65.85％。 2.免疫球蛋白治療可降低癲癇大鼠血清NSE水平，提示免疫球蛋白對(duì)癲癇大鼠神經(jīng)元有保護(hù)作用。 3.免疫球蛋白對(duì)控制大鼠癲癇發(fā)作具有明顯療效，能減少癲癇