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1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文利用寡核苷酸芯片檢測(cè)部分白血病相關(guān)基因改變姓名:李焱申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:梁后杰20030501第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文DetectingSomeKindsofGeneChangesinLeukemiawithOligonucleotideMicroarrayAbstractohjective:TherearemanygeneticsubstancechangesinleukemiaPhchro
2、mosomeisthefirstoneofthechromosomesthatiSfoundtObeassociatedwithleukemiaWhatthePhchromosomecauseistheformationofBCR—ABLfusiongenewhichcanbeseeninnearly90%ofCMLpatientsPhnegativepatientsalsocanbedividedintotwogroupsbasedo
3、nhavingornothavingtherearrangementofBCRThetwogroupshavedifferentprognosisBesidesthegenechangesdirectlyassociatedwithkaryotype,therearemanyothergeneabnormalitiesinleukemiaForexample,wecanseeP53andKrasgenemutationsinmanysp
4、eciesoftumorTheyalsocanbeseeninleukemiaTheinactivationofP53isassociatedwiththeacutetransformationphaseanddevelopmentofCMLAlthoughKrasmutationisnotseenfrequentlyinleukemia,itisalseportedtOplayaroleinthepathogenesisanddeve
5、lopmentofleukemiaSowecanseetheimportanceofdetectionofgenechangesindiagnosis,disease。typing,therapyandjudgmentofprognosisofleukemiaInthisexperiment,weprepareoligonucleotidemicroarraytOdetectthetWOkindsofgene—changesinleuk
6、emiaMethods:AfterpreparingtheoligonucleotidemicroarrayweadoptedtwowaystodetectfusiongeneandgenemutationsrespectivelyAsforthefusiongene,wechosetwocellstrainsasthedetectiontargetsOnewasknownexpressingtheBCRABLfusiongeneand
7、theotherwasnotCelltotalRNAwasextracted,andthenitwasreverse—transcriptedandfluorescencelabeledAtlasttheeDNAwashybridizedwiththemicroarrayForthegenemutations,thebonemarrowsampleswerecollectedfromthepatientsandthegenomeDNAw
8、aSextractedWeamplifiedandlabeledthetargetsequencesbyPCRThenthePCRproductwashybridizedwiththemicroarrayResults:Thepreparedchiphadwell—distributedbackgroundandtheprobeblotchesonitwereregularFromthehybridizationresults,wesa
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