苦參堿誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞凋亡的體外研究.pdf

1、研究背景：視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤（retinoblastoma，Rb）是嬰幼兒最常見的原發(fā)性眼內(nèi)惡性腫瘤，在我國(guó)治療以眼球摘除及眼外放療為主，而發(fā)達(dá)國(guó)家越來越趨向用個(gè)性化綜合治療，其中包括眼球摘除、外照射放療(EBRT)、近距放療、溫?zé)岑煼ǎ═TT）、化學(xué)減容、全身化療等。而化學(xué)治療是保守治療的主要方法之一?？鄥A(matrine，Mat)是傳統(tǒng)中藥苦豆子等的主要有效成分。多項(xiàng)體外研究發(fā)現(xiàn)苦參堿具有劑量、時(shí)間依賴性地誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡的作

2、用，小劑量苦參堿也可抑制腫瘤細(xì)胞增殖與誘導(dǎo)細(xì)胞分化。
　　 目的：探討苦參堿體外誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞株凋亡作用，為其在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤治療中的應(yīng)用前景提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：以體外培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞株為研究對(duì)象，0.4mmol/L濃度的苦參堿分別作用視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞（Rb）12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)，陰性對(duì)照組以等量含10％類標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清 RPMI-1640 培養(yǎng)液替代苦參堿。離心，收集細(xì)胞，用冷PBS

3、洗滌三次，依據(jù)AnnexinV-FITC/PI雙染試劑盒說明染色，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：苦參堿作用視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞（Rb）12h后可觀察到細(xì)胞開始凋亡，48h內(nèi)呈時(shí)間依賴性。流式細(xì)胞儀檢測(cè)未經(jīng)藥物作用的細(xì)胞凋亡率僅為6.71±0.31％,加入作用12小時(shí)后，細(xì)胞凋亡率增加至14.88±0.99％,與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞凋亡率逐步增加，24小時(shí)細(xì)胞凋亡率達(dá)到2