苦參堿誘導(dǎo)體外大鼠肝星狀細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、目的：研究苦參堿對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠肝星狀細(xì)胞(HepaticStellateCells，HSC)系rHSC-99凋亡的影響，以及對(duì)rHSC-99中神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nervegrowthfactor，NGF)及其低親和力受體p75，核轉(zhuǎn)錄因子(nuclearfactorkappBNF-KB)及半胱天冬激酶-3(Caspase-3)表達(dá)的影響，探討苦參堿誘導(dǎo)大鼠肝星狀細(xì)胞凋亡的機(jī)制。 方法：體外培養(yǎng)大鼠肝星狀細(xì)胞系rHSC-99，不同濃

2、度(0．12mg／ml，0．24mg／ml，0．48mg／m1)的苦參堿干預(yù)24h后，應(yīng)用TUNEL法檢測(cè)rHSC-99凋亡，用半定量RT-PCR方法及免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)NGF，p75，NF-KB及Caspase-3的表達(dá)情況，分析它們表達(dá)量與凋亡率的關(guān)系。 結(jié)果：不同濃度的苦參堿干預(yù)rHSC-9924h后，rHSC-99凋亡率隨苦參堿的濃度增大而增高，并且凋亡率在0．48mg／ml苦參堿濃度時(shí)最高(P<0．01)：NGF，p

3、75，Caspase-3mRNA及它們的蛋白表達(dá)隨苦參堿的濃度加大而表達(dá)升高，在0．24mg／ml苦參堿濃度時(shí)表達(dá)最高(P<0．01)；NF-KB隨苦參堿的濃度加大而表達(dá)下降，在0．48mg/ml時(shí)為最低(P<0．01)。 結(jié)論：苦參堿能顯著誘導(dǎo)rHSC-99凋亡；NGF/p75途徑參與苦參堿誘導(dǎo)的rHSC-99凋亡過(guò)程：NGF／p75通路的激活，下調(diào)NF-rd3蛋白表達(dá)，上調(diào)Caspase-3蛋白表達(dá)，可能是苦參堿誘導(dǎo)rHSC