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文檔簡介
1、目的:
觀察幼貓視覺功能破壞后視皮層17區(qū)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derivedneurotropic factor,BDNF)及神經(jīng)突生長抑制因子(neurite outgrowth inhibitorA,Nogo-A)表達變化,探討神經(jīng)因子在雙眼視覺形成與破壞中的可能作用。
方法:
3周齡健康家貓36只,應用圖形視覺誘發(fā)電位排除視路疾患及視覺障礙者,將正常幼貓隨機分為三組:正常對照組
2、,形覺剝奪組,光學性斜視組。在生后4周時對形覺剝奪組動物行右側眼瞼裂縫合,光學性斜視組佩戴自制的雙眼基底向內15△的三棱鏡,建立視覺破壞的模型。在動物6周、10周、16周齡時先行P-VEP檢測篩選成功的模型動物,再使用大腦立體定位儀對視皮層17區(qū)進行取材,檢測BDNF及Nogo-A mRNA在17區(qū)全層在不同時間段三組中的表達水平;免疫組織化學染色觀察17區(qū)第Ⅳ層BDNF及Nogo-A蛋白的表達水平。
結果:
3、 1.P-VEP檢測:正常對照組幼貓隨年齡增長P波潛時逐漸縮短,振幅逐漸增大,雙眼振幅大于單眼振幅之和;形覺剝奪組幼貓未剝奪眼振幅與潛時較對照組無明顯差異(P>0.05),剝奪眼振幅較對照組降低(P<0.05),雙眼振幅小于單眼振幅之和;光學性斜視組單眼P波振幅與潛時較正常對照組無顯著性差異(P<0.05),雙眼振幅小于單眼振幅。
2.熒光定量PCR檢測:各組視皮層17區(qū)BDNF mRNA均在6周時表達最高,隨后逐漸降低,
4、形覺剝奪組和光學性斜視組BDNF mRNA的表達較正常組降低(P<0.05),但其兩者相比無顯著性差異(P>0.05);各組Nogo-A mRNA在16周時表達最高,形覺剝奪組和光學性斜視組Nogo-A mRNA的表達較正常組降低,形覺剝奪組的表達最低,兩者相比有顯著性差異(P<0.05)。
3.免疫組織化學檢測:視皮層17區(qū)各層均可見免疫染色陽性細胞,正常對照組17區(qū)第Ⅳ層BDNF的表達在6周時達最高,之后逐漸降低,形覺
5、剝奪致其表達降低,在光學性斜視組BDNF的表達進一步降低;正常對照組17區(qū)第Ⅳ層Nogo-A的表達在16周時達最高,形覺剝奪組與光學性斜視組表達則較同期對照組降低,但形覺剝奪組與光學性斜視組兩組間相比,差異無顯著性(P>0.05)。
結論:
雙眼佩戴三棱鏡可以打破貓的雙眼視覺,從而建立雙眼視覺破壞的動物模型;且戴三棱鏡所造成的視覺破壞與形覺剝奪所致的不同,其雙眼視覺被破壞的程度更明顯。BDNF與Nogo-A參
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