透腦屏障的模擬腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子融合多肽的神經(jīng)保護作用及機制研究.pdf

1、背景:阿爾茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)是一種臨床表現(xiàn)為進行性記憶認知功能障礙的神經(jīng)退行性疾病,是最常見的老年期癡呆,且患病率日趨上升,給家庭和社會帶來了沉重的負擔。由于其病因和發(fā)病機制復雜,目前尚無特效藥。腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)是一類對多種神經(jīng)元均有保護作用的神經(jīng)營養(yǎng)因子,可通過激活TrkB受體及其下游Erk1/2和Akt信號轉導通路促進神

2、經(jīng)元的存活、增殖分化和損傷修復。由于BDNF分子量大不能透過血腦屏障和藥物半衰期較短等因素,大大制約了BDNF的臨床應用。因此,我們在本研究中應用具有穿透生物膜作用的TAT肽和模擬BDNF的核心片段組成一段融合多肽。
　　目的:研究由TAT肽和模擬BDNF的核心片段組成的融合多肽是否具有神經(jīng)保護和促進學習記憶能力,并探討其作用機制。
　　方法:本實驗首先用EGFP標記TAT,檢測其透過血腦屏障的能力。然后分別在東莨菪堿所致癡

3、呆的大鼠模型和APP轉基因小鼠模型中外周給予融合多肽,用水迷宮檢測動物的學習記憶能力改變,通過免疫印跡和免疫組化測定突觸相關蛋白的表達,并根據(jù)模型動物的特征分別檢測了膽堿能相關的酶的活性(AChE、ChAT)和Aβ的水平,為探討機制我們進一步檢測了TrkB受體和下游信號轉導分子Erk1/2、Akt及其磷酸化水平,同時檢測轉錄因子和即早基因的表達。
　　結果:我們發(fā)現(xiàn)(1)TAT具有攜帶大分子物質穿透血腦屏障的能力。(2)融合多肽能

4、逆轉由東莨菪堿所導致的大鼠癡呆,促進突觸素和M受體的表達并降低AChE的活性,其機制為融合多肽激活TrkB受體,促進下游Erk1/2、Akt信號轉導通路以及轉錄因子CREB的活化。(3)融合多肽改善APP轉基因小鼠的學習記憶能力障礙,減少Aβ的水平和tau蛋白的過度磷酸化,增加突觸相關蛋白PSD93、PSD95的表達,其作用機制為融合多肽激活TrkB受體,啟動下游Erk1/2、Akt信號轉導通路降低BACE1、PS1以及GSK-3β活性