山莨菪堿對大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷時內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響.pdf

1、背景與目的:本課題組以往研究表明,過度訓(xùn)練可導(dǎo)致大鼠橫紋肌溶解,進(jìn)而導(dǎo)致急性腎損傷(AKI),其中細(xì)胞凋亡機(jī)制發(fā)揮著重要作用,山莨菪堿可通過抑制細(xì)胞凋亡發(fā)揮腎保護(hù)作用,而山莨菪堿抗凋亡的具體作用機(jī)制值得探討。研究表明,當(dāng)細(xì)胞暴露于缺氧、營養(yǎng)缺乏、氧化應(yīng)激、蛋白質(zhì)異常糖基化反應(yīng)以及鈣穩(wěn)態(tài)失衡等因素時,會導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)未折疊或誤折疊蛋白質(zhì)蓄積,誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)。ERS是細(xì)胞的一種自我保護(hù)機(jī)制,但過強(qiáng)或持續(xù)時間過長的ERS可引起細(xì)胞凋亡

2、。ERS介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡參與了急性腎損傷的病理生理過程,山莨菪堿抗凋亡機(jī)制是否與ERS有關(guān)尚不清楚。本研究擬評價山莨菪堿對大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷時ERS的影響,以探討其抗凋亡的機(jī)制,為臨床研究提供參考。
　　方法:雄性SD大鼠42只,體重200~220g,采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分為3組:對照組(C組,n=6),雙側(cè)后肢肌肉注射生理鹽水10ml/kg;急性腎損傷組(AKI組,n=18),雙側(cè)后肢肌肉注射50％(v/v)甘油10ml/

3、kg;山莨菪堿組(AD組,n=18),腹腔注射山莨菪堿10mg/kg,20min后處理同AKI組。C組于肌肉注射生理鹽水后即刻(T0),AKI組和AD組于甘油給藥后1h(T1)、6h(T2)、24h(T3)分別隨機(jī)取6只大鼠,抽取靜脈血樣測定血漿尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)和肌紅蛋白(Mb)的濃度;采集腎組織標(biāo)本,HE染色后行腎小管損傷評分,免疫組化和Western blot法測定腎組織葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78

4、)和氧調(diào)節(jié)蛋白150(ORP150)表達(dá)。
　　結(jié)果:與C組比較,AKI組和AD組T2、T3時血漿BUN濃度升高(P<0.01),AKI組T2、T3時和AD組T3時血漿Cr濃度升高(P<0.05或0.01),AKI組和AD組T1、T2時血漿CK濃度升高(P<0.01),各時點血漿Mb濃度升高(P<0.05或0.01),腎小管損傷評分升高(P<0.01),腎組織GRP78和ORP150表達(dá)上調(diào)(P<0.01);與AKI組比較,AD組

5、各時點血漿BUN濃度降低(P<0.05或0.01),T3時血漿Cr濃度降低(P<0.01),T1、T2時血漿CK濃度降低(P<0.05或0.01),T3時血漿Mb濃度降低(P<0.05),各時點腎小管損傷評分降低(P<0.05或0.01),腎組織GRP78和ORP150表達(dá)下調(diào)(P<0.05或0.01)。血漿Mb濃度與BUN、Cr濃度呈正相關(guān)(r=0.872,P<0.01;r=0.716,P<0.01);GRP78/GAPDH和ORP1