褪黑素(Melatonin MT)對大鼠急性脊髓損傷內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激蛋白GADD153-CHOP表達的影響.pdf

1、目的:觀察褪黑素(melatonin,MT)對大鼠急性脊髓損傷(ASCI)后脊髓組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關蛋白GADD153/CHOP表達的影響,探討其對脊髓損傷的保護作用及機制。
　　 方法:以改良Allen’s法制作SD大鼠脊髓損傷動物模型(使用10g金屬棒從2.5cm高度打擊大鼠T9-10)。96只SD大鼠隨機分為三大組:脊髓損傷褪黑素(MT)治療組及脊髓損傷5％乙醇處理組和生理鹽水(NS)處理組,上述每個組又按不同時間點3h、1

2、d、3d、7d各分四個處理組,每組8 R實驗大鼠,共十二組；所有實驗動物按分組在相應時間點3h、1d、3d、7d處死并獲取損傷節(jié)段脊髓組織標本,每只實驗大鼠處死前以改良Tarlov評分法評價其神經(jīng)功能,所有脊髓組織標本均以免疫組化法檢測CHOP表達及TUNEL方法檢測細胞凋亡來評估褪黑素組與乙醇、鹽水處理組間的差異。其量的評定借助于麥克奧迪數(shù)碼醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)A(Motic.med6.0)軟件,結(jié)果分別用IOD(integrated o

3、ptical densit),累積光密度)及細胞凋亡指數(shù)(AI)來表示。
　　 結(jié)果:MT組與乙醇處理組、NS處理組不同時間點處死前Tarlov評分依次分別為:3(h)小時Tarlov評分為2.82±0.12和2.68±0.21、2.71±0.17；1(d)天Tarlov評分為2.68±0.06和2.58±0.06、2.52±0.19；3(d)天Tarlov評分為2.60±0.37和2.37±0.11、2.38±0.12；7(d

4、)天Tarlov評分為3.51±0.08和2.85±0.04、2.80±0.10；MT組與乙醇處理組、NS處理組比較,除3h時間點外,其他各個時間點MT組大鼠Tarlov評分明顯高于乙醇處理組、NS處理組,且有統(tǒng)計學差異(p＜0.05),以3d時間點后MT組脊髓功能改善更明顯。乙醇處理組與NS處理組之間各時間點Tarlov評分比較差異無統(tǒng)計學意義。CHOP在各組大鼠脊髓組織中均呈陽性表達,MT組與乙醇處理組、NS處理組除3小時時間點CH

5、OP表達差異無統(tǒng)計學意義外,其他各時間點CHOP表達明顯低于乙醇、NS組,且有統(tǒng)計學意義(p＜0.05),乙醇處理組與NS處理組之間各時間點CHOP表達差異無統(tǒng)計學意義。MT組內(nèi),3h組和1d組、3d組、7d組各組CHOP表達差異均有統(tǒng)計學意義(p＜0.05),且CHOP表達呈現(xiàn)3h＜1d＜3d＞7d之特點。TUNEL方法檢測細胞凋亡發(fā)現(xiàn)MT組和乙醇處理組、NS處理組3h即出現(xiàn)細胞凋亡,三組均于3d達到凋亡高峰,7d凋亡下降,三組除3h

6、時間點細胞凋亡指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義外,其他各時間點MT組與乙醇處理組、NS處理組細胞凋亡差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),MT組細胞凋亡指數(shù)明顯低于乙醇處理組、NS處理組,且有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),乙醇處理組與NS處理組間細胞凋亡指數(shù)比較差異無統(tǒng)計學意義。MT組內(nèi)各時間點的細胞凋亡差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05),且細胞凋亡指數(shù)呈現(xiàn)3h＜1d＜3d＞7d之特點。
　　 結(jié)論:
　　 1.本實驗運用改良Allen’