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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)(endoplasmic reticulum stress,ERS)以及活血化瘀方劑對(duì)ERS的影響。
方法:健康成年清潔型Wistar大鼠88只,隨機(jī)分為空白對(duì)照組(8只),高眼壓組(40只),治療組(40只)。除對(duì)照組外所有大鼠均隨機(jī)取一眼制作急性高眼壓模型,治療組在造模后給予活血化瘀方劑4ml/d灌胃,高眼壓組和治療組大鼠分別在造模后12h、1d,3d,7d,14d處死。H
2、E染色光鏡下觀察各組視網(wǎng)膜組織的形態(tài)學(xué)變化,免疫組織化學(xué)方法觀察視網(wǎng)膜GRP78、Thy-1-表達(dá)的變化,實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法觀察視網(wǎng)膜GRP78mRNA、Thy-1mRNA的變化。
結(jié)果:1.光鏡:高眼壓組造模后12h,視網(wǎng)膜全層水腫,胞核腫脹,視網(wǎng)膜變厚。造模后1d,視網(wǎng)膜水腫達(dá)高峰。造模后3d,視網(wǎng)膜水腫減輕,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinalganglial cells,RGCs)數(shù)目有所減少,視網(wǎng)膜開始變薄。造
3、模后7d,RGCs排列更加疏松。造模后14d,RGCs數(shù)目稀少,視網(wǎng)膜萎縮。治療組較高眼壓組在各時(shí)間點(diǎn)的變化趨勢(shì)相同,但程度都輕于高眼壓組。2.免疫組織化學(xué):高眼壓組造模后12h,GRP78的表達(dá)量較正常對(duì)照組迅速上調(diào)(P<0.05),造模后1d,GRP78表達(dá)量達(dá)高峰(P<0.05),造模后3d表達(dá)量迅速降低,但仍高于對(duì)照組(P<0.05)。治療組GRP78表達(dá)量在造模后12h較正常對(duì)照組顯著增多(P<0.05);造模后1d達(dá)高峰,但
4、增加量少于同時(shí)間點(diǎn)高眼壓壓組(P<0.05);造模后3d表達(dá)量降低,且低于同時(shí)間點(diǎn)高眼壓組(P<0.05)。造模后7d,14d高眼壓組、治療組、對(duì)照組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。造模后14d,高眼壓組和治療組Thy-1的表達(dá)量均降低,但治療組Thy-1表達(dá)量明顯高于高眼壓組。3.實(shí)時(shí)定量RT-PCR:高眼壓組造模后12h,GRP78mRNA水平較正常對(duì)照組迅速上調(diào)(P<0.05),造模后1d,GRP78mRNA水平達(dá)高峰(P<0.
5、05),造模后3d表達(dá)量迅速降低,但仍高于對(duì)照組(P<0.05)。治療組GRP78mRNA表達(dá)量在造模后12h較正常對(duì)照組顯著增多(P<0.05);造模后1d達(dá)高峰,但增加量少于同時(shí)間點(diǎn)加壓組(P<0.05);造模后3d表達(dá)量降低,且低于同時(shí)間點(diǎn)高眼壓組(P<0.05)。造模后7d,14d高眼壓組、治療組、對(duì)照組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。造模后14d,高眼壓組和治療組Thy-1mRNA均降低,但治療組Thy-1mRNA水平明顯高
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