腹腔感染所致腸源性內(nèi)毒素易位對機體免疫平衡的影響.pdf

1、目的：觀察腹腔感染狀態(tài)下大鼠腸粘膜形態(tài)學(xué)和通透性改變以及機體產(chǎn)生細胞因子的變化，研究腹腔感染所致腸源性內(nèi)毒素易位途徑和分布規(guī)律，研究腸源性內(nèi)毒素易位導(dǎo)致全身循環(huán)和腸系膜淋巴結(jié)細胞免疫失衡的規(guī)律以及兩者之間的聯(lián)系，探討調(diào)節(jié)性T細胞在機體免疫狀態(tài)變化中的作用，探討清熱解毒方劑的腸屏障保護功能和影響機體免疫狀態(tài)的機制。 方法：采用人工胃液聯(lián)合大腸桿菌腹腔內(nèi)注射的方法制作大鼠腹腔感染致MODS模型，觀察造模后回腸、腸系膜淋巴結(jié)、肺、肝、

2、脾、腎等組織的病理學(xué)改變；測定血漿內(nèi)毒素、血清TNF-α、IL-6、IL-10水平；檢測肺組織MPO、血清ALT、Cr含量；測定各組動物6小時尿液中乳果糖與甘露醇濃度的比值(L/M)；以FITC標(biāo)記的LPS灌胃，用熒光化學(xué)發(fā)光檢測儀檢測門靜脈血、乳糜管淋巴液、腹主動脈血以及腸系膜淋巴結(jié)、肝、肺、腸、脾組織FITC熒光強度；運用流式細胞儀觀察大鼠造模后腹主動脈血和腸系膜淋巴結(jié)中Th1/Th2比值和調(diào)節(jié)性T細胞所占比例的變化；同時觀察清熱解

3、毒方劑對上述指標(biāo)的影響。 結(jié)果：模型對照組腸粘膜鏡下形態(tài)學(xué)發(fā)生改變，血漿內(nèi)毒素水平和血清TNF-α、IL-6、IL-10水平均明顯升高，同時伴有血清ALT、Cr及肺組織MPO的升高，L/M比值顯著升高，臟器組織中FITC-LPS含量由高至低為：腸系膜淋巴結(jié)、肺、肝、腸、脾，體液中FITC-LPS含量以乳糜管淋巴液含量最高，清熱解毒方劑可以降低腹腔感染時腸粘膜的通透性，降低血中內(nèi)毒素和細胞因子水平。模型組全身循環(huán)中Th1/Th2在

4、造模后早期升高，從造模后24h開始顯著下降，而腸系膜淋巴結(jié)Th1/Th2在造模后12h開始持續(xù)降低，即腸系膜淋巴結(jié)Th1/Th2的降低早于血液循環(huán)中該比值的降低。模型組循環(huán)中Treg細胞比例在6h顯著降低，24h開始持續(xù)升高，與循環(huán)中Th1/Th2的變化呈線性負相關(guān)(r2=0.811)，腸系膜淋巴結(jié)Treg細胞比例在6h顯著降低，12h明顯升高，48h、72h繼續(xù)上升，與腸系膜淋巴結(jié)Th1/Th2呈線性負相關(guān)(r2=0.841)。清熱解

5、毒方劑治療組全身循環(huán)中和腸系膜淋巴結(jié)中的Th1/Th2和Treg的升高或降低的幅度均低于模型組。 結(jié)論：重度腹腔感染可造成腸屏障結(jié)構(gòu)破壞及通透性增加，發(fā)生腸源性內(nèi)毒素易位；腸源性內(nèi)毒素在腹腔感染早期主要經(jīng)腸淋巴途徑進入循環(huán)，表現(xiàn)為內(nèi)毒素在乳糜管及腸系膜淋巴結(jié)、肺、肝組織中的含量較高；清熱解毒中藥可明顯抑制腹腔感染大鼠腸道內(nèi)毒素易位，有效降低腹腔感染大鼠血中內(nèi)毒素及細胞因子水平，減輕臟器的損害。腹腔感染早期，機體Th1型反應(yīng)占優(yōu)勢

6、，隨著腸源性內(nèi)毒素易位的增加，Th2型反應(yīng)逐漸增強，出現(xiàn)Th1向Th2的漂移，清熱解毒方劑可以顯著減輕Th1型和Th2型反應(yīng)的程度；腹腔感染導(dǎo)致循環(huán)中Treg細胞比例升高，是導(dǎo)致Th1向Th2的漂移的重要原因，清熱解毒方劑可以顯著減輕Treg細胞比例升高的幅度，起到維持機體免疫平衡的作用。腸系膜淋巴結(jié)T細胞在腹腔感染早期先于全身循環(huán)出現(xiàn)Th1向Th2的漂移，導(dǎo)致腸系膜淋巴結(jié)發(fā)生細胞免疫抑制，對腸源性內(nèi)毒素清除能力降低，加重內(nèi)毒素淋巴途徑